Μετάβαση στο περιεχόμενο
Sp2/0-Ag14
Ιστός
Αίμα
Ασθένεια
Υβρίδιο κυττάρων Β
Συνώνυμα
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Έγγραφα

Sp2/0-Ag14

Cell line · Αριθμός προϊόντος 400481

Η κυτταρική σειρά Sp2/0-Ag14, που συνήθως αναφέρεται ως Sp2/0, είναι μια κυτταρική σειρά μυελοώματος ποντικού που χρησιμοποιείται ευρέως για την παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων. Προέλευση...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Χαμηλά αποθέματα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά Sp2/0-Ag14, που συνήθως αναφέρεται ως Sp2/0, είναι μια κυτταρική σειρά μυελώματος ποντικού που χρησιμοποιείται ευρέως για την παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων. Προερχόμενη από το στέλεχος ποντικών BALB/c, η εν λόγω κυτταρική σειρά αναπτύχθηκε με τη σύντηξη κυττάρων σπλήνα από ανοσοποιημένους ποντικούς με κύτταρα μυελώματος που στερούνται το ένζυμο φωσφοριβοζυλοτρανσφεράση υποξανθίνης-γουανίνης (HGPRT). Η ανεπάρκεια αυτή καθιστά τα κύτταρα Sp2/0 ανίκανα να επιβιώσουν σε μέσο HAT (υποξανθίνη, αμινοπτερίνη, θυμιδίνη), ένα χαρακτηριστικό κρίσιμο για την επιλογή των υβριδωμάτων όταν συγχωνεύονται με κύτταρα σπληνός από ανοσοποιημένα ποντίκια, καθώς μόνο τα κύτταρα υβριδωμάτων μπορούν να πολλαπλασιαστούν σε αυτό το εκλεκτικό μέσο.

Η κυτταρική σειρά Sp2/0-Ag14 χαρακτηρίζεται από τη σταθερότητα και την ευρωστία της στην κυτταροκαλλιέργεια, γεγονός που την καθιστά προτιμώμενο ξενιστή για την παραγωγή υβριδώματος. Η απουσία παραγωγής ανοσοσφαιρινών σε αυτά τα κύτταρα είναι ένα κρίσιμο χαρακτηριστικό, διότι αποτρέπει την έκκριση ενδογενών ανοσοσφαιρινών που θα μπορούσαν να παρεμποδίσουν το μονοκλωνικό αντίσωμα που παράγεται από τα υβριδώματα. Αυτή η κυτταρική σειρά έχει χρησιμοποιηθεί εκτενώς στην επιστημονική έρευνα και σε βιομηχανικές εφαρμογές για την παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων έναντι ευρέος φάσματος αντιγόνων. Τα αντισώματα που παράγονται χρησιμοποιούνται στην έρευνα, τη διάγνωση και τις θεραπευτικές εφαρμογές, αναδεικνύοντας τη σημαντική χρησιμότητα της κυτταρικής σειράς Sp2/0 στη βιοτεχνολογική και φαρμακευτική βιομηχανία.

Ιστός
Αίμα
Ασθένεια
Υβρίδιο κυττάρων Β
Συνώνυμα
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Ιδιότητες ανάπτυξης
Σε επαφή με την επιφάνεια και σε εναιώρημα
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Στρογγυλά κύτταρα

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
Sp2/0-Ag14 (αριθμός καταλόγου Cytion 400481)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_2199

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
H-2d
Ιοί
Εξετάστηκε και βρέθηκε αρνητικό για τον ιό της εκτρομελίας (ποντικοπαρωτίτιδα).

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Συλλέξτε το μέσο με τα κύτταρα που επιπλέουν σε ένα σωληνάριο μικροφυγοκέντρησης. Ξεπλύνετε τα προσκολλημένα κύτταρα χρησιμοποιώντας PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο (3-5 ml PBS για φιάλες κυτταροκαλλιέργειας T25, 5-10 ml για φιάλες κυτταροκαλλιέργειας T75). Προσθέστε Accutase (1-2ml ανά φιάλη κυτταροκαλλιέργειας T25, 2,5ml ανά φιάλη κυτταροκαλλιέργειας T75), το φύλλο των κυττάρων πρέπει να καλυφθεί πλήρως. Επώαση στους 37 βαθμούς Κελσίου για 10 λεπτά. Συνδυάστε τα κύτταρα που επιπλέουν και τα αποκολλημένα κύτταρα σε ένα σωληνάριο, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Επαναεναιωρήστε προσεκτικά τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και διανείμετε τα σε νέες φιάλες που περιέχουν φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
Διατηρήστε την κυτταρική πυκνότητα μεταξύ 5 x 104 και 5 x 106 βιώσιμων κυττάρων/ml.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
BALB/c