Gå direkte til indholdet
Sp2/0-Ag14
Væv
Blod
Sygdom
B-celle-hybridom
Synonymer
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Dokumenter

Sp2/0-Ag14

Cell line · Varenummer 400481

Cellelinjen Sp2/0-Ag14, der ofte benævnes Sp2/0, er en myelomcellelinje fra mus, der i vid udstrækning anvendes til fremstilling af monoklonale antistoffer. Oprindelse...

€430.00ekskl. moms og fragt
Begrænset lagerbeholdning
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Sp2/0-Ag14-cellelinjen, almindeligvis kaldet Sp2/0, er en murin myelomcellelinje, der i vid udstrækning anvendes til produktion af monoklonale antistoffer. Denne cellelinje stammer fra BALB/c-musestammen og blev udviklet ved at fusionere miltceller fra immuniserede mus med myelomceller, der mangler enzymet hypoxanthin-guanin-phosphoribosyltransferase (HGPRT). Denne mangel gør Sp2/0-celler ude af stand til at overleve i HAT-medium (hypoxanthin, aminopterin, thymidin), en funktion, der er afgørende for udvælgelse af hybridomer, når de fusioneres med miltceller fra immuniserede mus, da kun hybridomacellerne kan formere sig i dette selektive medium.

Sp2/0-Ag14-cellelinjen er kendetegnet ved sin stabilitet og robusthed i cellekultur, hvilket gør den til en foretrukken vært for hybridomproduktion. Fraværet af immunglobulinproduktion i disse celler er en kritisk egenskab, fordi det forhindrer udskillelsen af endogene immunglobuliner, der kan forstyrre det monoklonale antistof, der produceres af hybridomerne. Denne cellelinje er blevet brugt i vid udstrækning i videnskabelig forskning og industrielle applikationer til at generere monoklonale antistoffer mod en bred vifte af antigener. De producerede antistoffer bruges i forskning, diagnostik og terapeutiske anvendelser, hvilket understreger Sp2/0-cellelinjens betydelige anvendelighed i den bioteknologiske og farmaceutiske industri.

Væv
Blod
Sygdom
B-celle-hybridom
Synonymer
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Klassificering

Organisme
Mus
Vækstegenskaber
Adhæsion og suspension
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Runde celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Sp2/0-Ag14 (Cytion katalognummer 400481)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
H-2d
Vira
Testet og fundet negativ for ectromelia-virus (musekopper).

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Oddyrkning
Opsaml mediet med flydende celler i et mikrocentrifugerør. Skyl de klæbende celler med PBS uden calcium og magnesium (3-5 ml PBS for T25, 5-10 ml for T75-cellekulturkolber). Tilsæt Accutase (1-2 ml pr. T25, 2,5 ml pr. T75-cellekulturkolbe), cellearket skal være helt dækket. Inkuber ved 37 grader Celsius i 10 minutter. Kombiner de flydende celler og de løsrevne celler i et rør, centrifuger ved 300xg i 3 minutter. Resuspender forsigtigt cellerne i frisk medium, og fordel dem i nye kolber, der indeholder frisk medium.
Såtæthed
Oprethold celletætheden mellem 5 x 104 og 5 x 106 levedygtige celler/ml.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
BALB/c