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HROG06 T0 M2
Tissu
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Maladie
Glioblastome

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HROG06 T0 M2

Cell line · Référence du produit 300883

HROG06 T0 M2 est une lignée cellulaire humaine primaire de glioblastome multiforme (GBM) issue d'un tissu tumoral fraîchement prélevé chez un patient adulte chez qui a été diagnostiqué…

€800.00hors taxes et frais de port
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01Informations générales

Description

HROG06 T0 M2 est une lignée cellulaire primaire humaine de glioblastome multiforme (GBM) établie à partir de tissu tumoral fraîchement réséqué provenant d'un patient adulte diagnostiqué avec un glioblastome de grade IV selon la classification de l'OMS. La désignation « T0 » indique que l'échantillon tumoral a été prélevé lors de l'intervention chirurgicale initiale, tandis que « M2 » fait référence au deuxième modèle in vitro généré indépendamment à partir de la même tumeur primaire. La lignée cellulaire a été développée au sein de la plateforme HROG (Hansestadt Rostock Glioma), qui se concentre sur la génération de cultures de gliomes à très faible passage qui préservent les caractéristiques biologiques et moléculaires de la tumeur originale du patient.

HROG06 T0 M2 se développe de manière adhérente dans des conditions de culture standardisées et présente une morphologie fusiforme, semblable à celle des fibroblastes, typique des cultures primaires de GBM. Les analyses immunophénotypiques de la série HROG démontrent l'expression de marqueurs de la lignée neuronale et gliale tels que la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP), la nestine et la vimentine, ce qui confirme l'origine astrocytaire de la tumeur. La caractérisation moléculaire au sein de la plateforme HROG comprend l'évaluation de biomarqueurs cliniquement pertinents tels que le statut de méthylation du promoteur MGMT, l'amplification de l'EGFR et le profil mutationnel de gènes tels que TP53, IDH1/2, KRAS et BRAF, confirmant la préservation des altérations génomiques associées à la tumeur dans les cultures à passage précoce.

HROG06 T0 M2 a été utilisé pour l'évaluation in vitro des réponses thérapeutiques aux traitements standard du glioblastome, notamment les agents chimiothérapeutiques alkylants et les inhibiteurs ciblés. Les analyses comparatives au sein de la collection HROG indiquent une morphologie stable, une cinétique de croissance reproductible et des profils de sensibilité aux médicaments cohérents dans les passages précoces, ce qui confirme son adéquation en tant que modèle de recherche translationnelle. En tant que lignée cellulaire GBM dérivée de patient et à faible passage, HROG06 T0 M2 fournit une plateforme cliniquement pertinente pour l'étude de la biologie du glioblastome, de l'hétérogénéité tumorale et des mécanismes de résistance au traitement.

Tissu
Cerveau
Maladie
Glioblastome

02Classification

Organisme
Humain
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
HROG06 T0 M2 (numéro de catalogue Cytion 300883)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FP

04Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons 50 % de milieu basal + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui contient des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

06Donateur

Origine ethnique
Caucasien