Skip to content
HROG06 T0 M2
Tissue
מוח
Disease
גליובלסטומה

Documents

HROG06 T0 M2

Cell line · Product number 300883

HROG06 T0 M2 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with ...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

HROG06 T0 M2 הוא קו תאים ראשוני של גליובלסטומה מולטיפורמה (GBM) אנושית, שהוקם מרקמת גידול שנותחה זה עתה מחולה בוגר שאובחן עם גליובלסטומה בדרגה IV על פי סיווג ארגון הבריאות העולמי (WHO). הסימון "T0" מציין כי דגימת הגידול נלקחה במהלך הניתוח הראשוני, ואילו "M2" מתייחס למודל השני שנוצר באופן עצמאי במבחנה, שמקורו באותו גידול ראשוני. קו התאים פותח במסגרת פלטפורמת HROG (Hansestadt Rostock Glioma), המתמקדת ביצירת תרבויות גליומה בעלות מעבר נמוך במיוחד, המשמרות את המאפיינים הביולוגיים והמולקולריים של הגידול המקורי של המטופל.

HROG06 T0 M2 גדל באופן דבק בתנאי תרבית סטנדרטיים ומציג מורפולוגיה דמוית סיב, דמוית פיברובלסט, האופיינית לתרבויות GBM ראשוניות. ניתוחים אימונופנוטיפיים בסדרת HROG מדגימים ביטוי של סמנים של שושלת עצבית וגלית, כגון חלבון חומצי פיברילרי גליאלי (GFAP), נסטין ווימנטין, התומכים במקור הגידול האסטרוציטי. האפיון המולקולרי בפלטפורמת HROG כולל הערכה של סמנים ביולוגיים רלוונטיים קלינית, כגון מצב מתילציה של מקדם MGMT, הגברה של EGFR ופרופיל מוטציות של גנים, כולל TP53, IDH1/2, KRAS ו-BRAF, המאשרים שימור של שינויים גנומיים הקשורים לגידול בתרבויות מעבר מוקדמות.

HROG06 T0 M2 שימש להערכה במבחנה של תגובות טיפוליות לטיפולים סטנדרטיים בגליובלסטומה, כולל חומרים כימותרפיים אלקיליים, וכן מעכבים ממוקדים. ניתוחים השוואתיים בתוך אוסף HROG מצביעים על מורפולוגיה יציבה, קינטיקה של צמיחה ניתנת לשחזור ופרופילים עקביים של רגישות לתרופות במעברים מוקדמים, מה שתומך בהתאמתו כמודל מחקר תרגומי. כקו תאים GBM נמוך מעבר שמקורו בחולים, HROG06 T0 M2 מספק פלטפורמה רלוונטית קלינית לחקר הביולוגיה של גליובלסטומה, ההטרוגניות של הגידול ומנגנוני העמידות לטיפול.

Tissue
מוח
Disease
גליובלסטומה

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
HROG06 T0 M2 (מספר קטלוגי Cytion 300883)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FP

04Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

06Donor

Ethnicity
קווקזי