HROG06 T0 M2

HROG06 T0 M2 to pierwotna ludzka linia komórkowa glejaka wielopostaciowego (GBM) utworzona ze świeżo wyciętej tkanki nowotworowej dorosłego pacjenta, u którego zdiagnozowano glejaka IV stopnia według klasyfikacji WHO. Oznaczenie „T0” wskazuje, że próbka guza została pobrana podczas pierwszej interwencji chirurgicznej, natomiast „M2” odnosi się do drugiego, niezależnie wygenerowanego modelu in vitro pochodzącego z tego samego pierwotnego guza. Linia komórkowa została opracowana w ramach platformy HROG (Hansestadt Rostock Glioma), która koncentruje się na tworzeniu kultur glejaków o bardzo niskiej liczbie pasażów, zachowujących biologiczne i molekularne cechy charakterystyczne dla pierwotnego guza pacjenta.

HROG06 T0 M2 rośnie przylegająco w standardowych warunkach hodowli i wykazuje morfologię wrzecionowatą, podobną do fibroblastów, typową dla pierwotnych kultur GBM. Analizy immunofenotypowe w serii HROG wykazują ekspresję markerów linii nerwowej i glejowej, takich jak kwaśne białko włókniste gleju (GFAP), nestina i wimentyna, co potwierdza astrocytowe pochodzenie nowotworu. Charakterystyka molekularna w ramach platformy HROG obejmuje ocenę klinicznie istotnych biomarkerów, takich jak status metylacji promotora MGMT, amplifikacja EGFR oraz profilowanie mutacji genów, w tym TP53, IDH1/2, KRAS i BRAF, potwierdzając zachowanie zmian genomowych związanych z nowotworem w hodowlach wczesnych pasażów.

HROG06 T0 M2 został wykorzystany do oceny in vitro odpowiedzi terapeutycznej na standardowe leczenie glejaka wielopostaciowego, w tym alkilujące środki chemioterapeutyczne, a także ukierunkowane inhibitory. Analizy porównawcze w ramach kolekcji HROG wskazują na stabilną morfologię, powtarzalną kinetykę wzrostu i spójne profile wrażliwości na leki we wczesnych pasażach, co potwierdza jej przydatność jako modelu badań translacyjnych. Jako pochodząca od pacjenta linia komórkowa GBM o niskiej liczbie pasażów, HROG06 T0 M2 stanowi platformę o znaczeniu klinicznym do badania biologii glejaka wielopostaciowego, heterogenności nowotworu i mechanizmów oporności na leczenie.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym