HROG06 T0 M2
Cell line · Productnummer 300883
HROG06 T0 M2 is een primaire menselijke glioblastoma multiforme (GBM)-cellijn die is opgezet uit vers verwijderd tumorweefsel van een volwassen patiënt bij wie de diagnose ... was gesteld.
Maatwerk / Aanbevelingen
- HROG06 T0 M2Cell line€800.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
HROG06 T0 M2 is een primaire humane glioblastoma multiforme (GBM) cellijn die is opgezet uit vers verwijderd tumorweefsel van een volwassen patiënt bij wie WHO-graad IV glioblastoma is vastgesteld. De aanduiding "T0" geeft aan dat het tumormonster is verkregen tijdens de eerste chirurgische ingreep, terwijl "M2" verwijst naar het tweede onafhankelijk gegenereerde in-vitromodel dat is afgeleid van dezelfde primaire tumor. De cellijn is ontwikkeld binnen het HROG-platform (Hansestadt Rostock Glioma), dat zich richt op het genereren van gliomaculturen met een ultralaag aantal passages die de biologische en moleculaire kenmerken van de oorspronkelijke tumor van de patiënt behouden.
HROG06 T0 M2 groeit hechtend onder gestandaardiseerde kweekomstandigheden en vertoont een spoelvormige, fibroblast-achtige morfologie die typisch is voor primaire GBM-culturen. Immunofenotypische analyses van de HROG-serie tonen de expressie aan van neurale en gliale afstammingsmarkers zoals gliaal fibrillair zuur eiwit (GFAP), nestine en vimentine, wat de astrocytaire oorsprong van de tumor ondersteunt. Moleculaire karakterisering binnen het HROG-platform omvat de beoordeling van klinisch relevante biomarkers, zoals MGMT-promotor-methylatiestatus, EGFR-amplificatie en mutatieprofilering van genen, waaronder TP53, IDH1/2, KRAS en BRAF, wat het behoud van tumor-geassocieerde genomische veranderingen in vroege passageculturen bevestigt.
HROG06 T0 M2 is gebruikt voor in-vitro-evaluatie van therapeutische reacties op standaardbehandelingen voor glioblastoom, waaronder alkylerende chemotherapeutische middelen en gerichte remmers. Vergelijkende analyses binnen de HROG-collectie wijzen op een stabiele morfologie, reproduceerbare groeikinetiek en consistente geneesmiddelgevoeligheidsprofielen in vroege passages, wat de geschiktheid ervan als translationeel onderzoeksmodel ondersteunt. Als een van patiënten afkomstige GBM-cellijn met een laag aantal passages biedt HROG06 T0 M2 een klinisch relevant platform voor het bestuderen van de biologie van glioblastoom, tumorheterogeniteit en mechanismen van behandelingsresistentie.
- Weefsel
- Hersenen
- Ziekte
- Glioblastoom
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- HROG06 T0 M2 (Cytion catalogusnummer 300883)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FP
04Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
06Donateur
- Etnische afkomst
- Kaukasisch
07Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er gelden overeenkomsten met derden
- Ja
.jpg)