HROG06 T0 M2

HROG06 T0 M2 é uma linhagem celular primária de glioblastoma multiforme (GBM) humano, estabelecida a partir de tecido tumoral recém-ressecado de um paciente adulto diagnosticado com glioblastoma de grau IV segundo a classificação da OMS. A designação “T0” indica que a amostra tumoral foi obtida na intervenção cirúrgica inicial, enquanto “M2” refere-se ao segundo modelo in vitro gerado de forma independente, derivado do mesmo tumor primário. A linhagem celular foi desenvolvida na plataforma HROG (Hansestadt Rostock Glioma), que se concentra na geração de culturas de glioma com número ultrabaixo de passagens, preservando as características biológicas e moleculares do tumor original do paciente.

A HROG06 T0 M2 cresce de forma aderente sob condições de cultura padronizadas e exibe uma morfologia fusiforme, semelhante à dos fibroblastos, típica de culturas primárias de GBM. Análises imunofenotípicas em toda a série HROG demonstram a expressão de marcadores das linhagens neural e glial, como a proteína fibrilar ácida glial (GFAP), nestina e vimentina, corroborando a origem astrocítica do tumor. A caracterização molecular na plataforma HROG inclui a avaliação de biomarcadores clinicamente relevantes, como o status de metilação do promotor do MGMT, a amplificação do EGFR e o perfil mutacional de genes, incluindo TP53, IDH1/2, KRAS e BRAF, confirmando a preservação das alterações genômicas associadas ao tumor em culturas de passagens iniciais.

O HROG06 T0 M2 tem sido utilizado para avaliação in vitro das respostas terapêuticas aos tratamentos padrão para glioblastoma, incluindo agentes quimioterápicos alquilantes, bem como inibidores direcionados. Análises comparativas dentro da coleção HROG indicam morfologia estável, cinética de crescimento reproduzível e perfis consistentes de sensibilidade a medicamentos nas primeiras passagens, comprovando sua adequação como modelo de pesquisa translacional. Como uma linhagem celular de GBM derivada de paciente e de baixa passagem, a HROG06 T0 M2 oferece uma plataforma clinicamente relevante para o estudo da biologia do glioblastoma, da heterogeneidade tumoral e dos mecanismos de resistência ao tratamento.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.