HROG06 T0 M2
Cell line · Product number 300883
HROG06 T0 M2 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with ...
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01General information
- Description
HROG06 T0 M2 es una línea celular de glioblastoma multiforme (GBM) humano primario establecida a partir de tejido tumoral recién extirpado de un paciente adulto diagnosticado con glioblastoma de grado IV según la clasificación de la OMS. La designación «T0» indica que la muestra tumoral se obtuvo durante la intervención quirúrgica inicial, mientras que «M2» se refiere al segundo modelo in vitro generado de forma independiente a partir del mismo tumor primario. La línea celular se desarrolló dentro de la plataforma HROG (Hansestadt Rostock Glioma), que se enfoca en generar cultivos de glioma de pases ultrabajos que conservan las características biológicas y moleculares del tumor original del paciente.
HROG06 T0 M2 crece de forma adherente en condiciones de cultivo estandarizadas y presenta una morfología fusiforme, similar a la de los fibroblastos, típica de los cultivos primarios de GBM. Los análisis inmunofenotípicos en toda la serie HROG demuestran la expresión de marcadores de linaje neural y glial, como la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), la nestina y la vimentina, lo que respalda el origen astrocítico del tumor. La caracterización molecular dentro de la plataforma HROG incluye la evaluación de biomarcadores clínicamente relevantes, como el estado de metilación del promotor de MGMT, la amplificación de EGFR y el perfil mutacional de genes como TP53, IDH1/2, KRAS y BRAF, lo que confirma la preservación de las alteraciones genómicas asociadas al tumor en cultivos de pases tempranos.
El HROG06 T0 M2 se ha utilizado para la evaluación in vitro de las respuestas terapéuticas a los tratamientos de referencia para el glioblastoma, incluidos los agentes quimioterapéuticos alquilantes, así como los inhibidores dirigidos. Los análisis comparativos dentro de la colección HROG indican una morfología estable, una cinética de crecimiento reproducible y perfiles de sensibilidad a los fármacos consistentes en los primeros pases, lo que respalda su idoneidad como modelo de investigación traslacional. Como línea celular de GBM derivada de pacientes y de bajos pases, HROG06 T0 M2 ofrece una plataforma clínicamente relevante para estudiar la biología del glioblastoma, la heterogeneidad tumoral y los mecanismos de resistencia al tratamiento.
- Tissue
- Cerebro
- Disease
- Glioblastoma
02Classification
- Organism
- Human
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- HROG06 T0 M2 (número de catálogo de Cytion 300883)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FP
04Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un 50 % de medio basal + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
06Donor
- Ethnicity
- caucásico
07Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Third-party agreements apply
- Yes
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