Skip to content
HROG06 T0 M2
Tissue
Não
Disease
U não đa hình

Documents

HROG06 T0 M2

Cell line · Product number 300883

HROG06 T0 M2 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with ...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

HROG06 T0 M2 là dòng tế bào u não đa hình (GBM) nguyên phát của người, được thiết lập từ mô u não mới được phẫu thuật cắt bỏ của một bệnh nhân người lớn được chẩn đoán mắc u não đa hình độ IV theo phân loại WHO. Ký hiệu “T0” cho biết mẫu khối u được thu thập trong lần phẫu thuật đầu tiên, trong khi “M2” đề cập đến mô hình in vitro thứ hai được tạo ra độc lập từ cùng một khối u nguyên phát. Dòng tế bào này được phát triển trong nền tảng HROG (Hansestadt Rostock Glioma), tập trung vào việc tạo ra các văn hóa glioma có số lần truyền rất thấp, giữ nguyên các đặc điểm sinh học và phân tử của khối u ban đầu của bệnh nhân.

HROG06 T0 M2 phát triển bám dính trong điều kiện nuôi cấy tiêu chuẩn và có hình thái dạng sợi, tương tự tế bào sợi, đặc trưng cho các văn hóa GBM nguyên phát. Phân tích miễn dịch hình thái trong loạt HROG cho thấy sự biểu hiện của các dấu hiệu dòng tế bào thần kinh và glial như protein acid fibrillary glial (GFAP), nestin và vimentin, hỗ trợ nguồn gốc u từ tế bào sao. Phân tích phân tử trong nền tảng HROG bao gồm đánh giá các dấu ấn sinh học có ý nghĩa lâm sàng như tình trạng metyl hóa promoter MGMT, khuếch đại EGFR và phân tích đột biến của các gen bao gồm TP53, IDH1/2, KRAS và BRAF, xác nhận việc bảo tồn các biến đổi di truyền liên quan đến khối u trong các dòng tế bào nuôi cấy giai đoạn sớm.

HROG06 T0 M2 đã được sử dụng để đánh giá in vitro phản ứng điều trị với các phương pháp điều trị glioblastoma tiêu chuẩn, bao gồm các tác nhân hóa trị alkylating và các chất ức chế đích. Phân tích so sánh trong bộ sưu tập HROG cho thấy hình thái ổn định, động học tăng trưởng có thể tái tạo và hồ sơ nhạy cảm với thuốc nhất quán trong các dòng tế bào sớm, hỗ trợ tính phù hợp của nó như một mô hình nghiên cứu chuyển giao. Là dòng tế bào glioblastoma được phân lập từ bệnh nhân với số lần truyền thấp, HROG06 T0 M2 cung cấp một nền tảng có ý nghĩa lâm sàng để nghiên cứu sinh học glioblastoma, đa dạng khối u và cơ chế kháng trị.

Tissue
Não
Disease
U não đa hình

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
HROG06 T0 M2 (Số catalog Cytion 300883)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FP

04Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng hỗn hợp 50% môi trường cơ bản + 40% huyết thanh bò phôi (FBS) + 10% DMSO, hoặc CM-1 (số catalog Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện khả năng phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

06Donor

Ethnicity
Người da trắng