Skip to content
HROG06 T0 M2
Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา

Documents

HROG06 T0 M2

Cell line · Product number 300883

HROG06 T0 M2 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with ...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

HROG06 T0 M2 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งสมองชนิดกลีโอโบลาสโตมา มัลติฟอร์ม (GBM) ชนิดปฐมภูมิ ซึ่งถูกสร้างขึ้นจากเนื้อเยื่อเนื้องอกที่เพิ่งถูกผ่าตัดออกจากผู้ป่วยผู้ใหญ่ที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นมะเร็งสมองชนิด WHO grade IV กลีโอโบลาสโตมา การกำหนด "T0" หมายถึงตัวอย่างเนื้องอกที่ได้จากการผ่าตัดครั้งแรก ในขณะที่ "M2" หมายถึงโมเดลในหลอดทดลองที่สองซึ่งสร้างขึ้นอย่างอิสระจากเนื้องอกปฐมภูมิเดียวกัน สายเซลล์ถูกพัฒนาขึ้นภายในแพลตฟอร์ม HROG (Hansestadt Rostock Glioma) ซึ่งมุ่งเน้นการสร้างวัฒนธรรมเนื้องอกในสมองที่มีการผ่านผ่านต่ำมากที่ยังคงลักษณะทางชีวภาพและโมเลกุลของเนื้องอกของผู้ป่วยเดิม

HROG06 T0 M2 เติบโตอย่างเหนียวแน่นภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงมาตรฐานและมีลักษณะรูปร่างคล้ายแกนหมุนคล้ายไฟโบรบลาสต์ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของการเพาะเลี้ยง GBM ชนิดปฐมภูมิ การวิเคราะห์ลักษณะภูมิคุ้มกันของซีรีส์ HROG แสดงให้เห็นการแสดงออกของตัวบ่งชี้สายพันธุ์ประสาทและเกลีย เช่น glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestin และ vimentin ซึ่งสนับสนุนต้นกำเนิดของเนื้องอกชนิดแอสโตรไซต์ การจำแนกลักษณะทางโมเลกุลภายในแพลตฟอร์ม HROG รวมถึงการประเมินตัวบ่งชี้ทางชีวภาพที่เกี่ยวข้องทางคลินิก เช่น สถานะการมีเมทิลเลชันของโปรโมเตอร์ MGMT การเพิ่มจำนวนของยีน EGFR และการวิเคราะห์การกลายพันธุ์ของยีนต่างๆ รวมถึง TP53, IDH1/2, KRAS และ BRAF ซึ่งยืนยันการคงอยู่ของการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอกในวัฒนธรรมเซลล์ระยะแรก

HROG06 T0 M2 ได้ถูกใช้ในการประเมินผลตอบสนองต่อการรักษาตามมาตรฐานสำหรับโรคกลีโอโบลาสโตมาในหลอดทดลอง รวมถึงยาเคมีบำบัดประเภทแอลคิลเลติ้ง และตัวยับยั้งเป้าหมายเฉพาะ การวิเคราะห์เชิงเปรียบเทียบภายในชุดข้อมูล HROG แสดงให้เห็นถึงลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่คงที่, การเจริญเติบโตที่สามารถทำซ้ำได้, และโปรไฟล์ความไวต่อยาที่สอดคล้องกันในระยะเริ่มต้นของการเพาะเลี้ยง ซึ่งสนับสนุนความเหมาะสมในการใช้เป็นแบบจำลองสำหรับการวิจัยเชิงแปลผล ในฐานะเซลล์ไลน์ GBM ที่ได้มาจากผู้ป่วยและผ่านการเพาะเลี้ยงในระดับต่ำ HROG06 T0 M2 จึงเป็นแพลตฟอร์มที่มีความเกี่ยวข้องทางคลินิกสำหรับการศึกษาชีววิทยาของโรคกลิโอบลาสโตมา, ความหลากหลายของเนื้องอก, และกลไกการดื้อยาต่อการรักษา

Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
HROG06 T0 M2 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300883)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FP

04Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

06Donor

Ethnicity
คอเคเชียน