HROG06 T0 M2
Cell line · Codice prodotto 300883
HROG06 T0 M2 è una linea cellulare primaria di glioblastoma multiforme (GBM) umano ottenuta da tessuto tumorale appena asportato da un paziente adulto a cui era stata diagnosticata una ...
Personalizzazione / Suggerimenti
- HROG06 T0 M2Cell line€800.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
HROG06 T0 M2 è una linea cellulare primaria di glioblastoma multiforme (GBM) umano ottenuta da tessuto tumorale appena asportato da un paziente adulto con diagnosi di glioblastoma di grado IV secondo la classificazione WHO. La designazione "T0" indica che il campione tumorale è stato ottenuto durante l'intervento chirurgico iniziale, mentre "M2" si riferisce al secondo modello in vitro generato in modo indipendente e derivato dallo stesso tumore primario. La linea cellulare è stata sviluppata all'interno della piattaforma HROG (Hansestadt Rostock Glioma), che si concentra sulla generazione di colture di glioma a passaggi ultra-bassi che preservano le caratteristiche biologiche e molecolari del tumore originale del paziente.
HROG06 T0 M2 cresce in modo aderente in condizioni di coltura standardizzate e presenta una morfologia fusiforme, simile a quella dei fibroblasti, tipica delle colture primarie di GBM. Le analisi immunofenotipiche della serie HROG dimostrano l'espressione di marcatori della linea neurale e gliale come la proteina acida fibrillare gliale (GFAP), la nestina e la vimentina, a sostegno dell'origine astrocitica del tumore. La caratterizzazione molecolare all'interno della piattaforma HROG include la valutazione di biomarcatori clinicamente rilevanti come lo stato di metilazione del promotore MGMT, l'amplificazione dell'EGFR e il profilo mutazionale di geni quali TP53, IDH1/2, KRAS e BRAF, confermando la conservazione delle alterazioni genomiche associate al tumore nelle colture a passaggio precoce.
HROG06 T0 M2 è stato utilizzato per la valutazione in vitro delle risposte terapeutiche ai trattamenti standard per il glioblastoma, compresi gli agenti chemioterapici alchilanti e gli inibitori mirati. Le analisi comparative all'interno della collezione HROG indicano una morfologia stabile, cinetica di crescita riproducibile e profili di sensibilità ai farmaci coerenti nei primi passaggi, a sostegno della sua idoneità come modello di ricerca traslazionale. In quanto linea cellulare GBM a basso passaggio derivata da pazienti, HROG06 T0 M2 fornisce una piattaforma clinicamente rilevante per lo studio della biologia del glioblastoma, dell'eterogeneità tumorale e dei meccanismi di resistenza al trattamento.
- Tessuto
- Cervello
- Malattia
- Glioblastoma
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 1
03Identificatori
- Riferimento bibliografico
- HROG06 T0 M2 (numero di catalogo Cytion 300883)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FP
04Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
06Donatore
- Etnia
- Caucasico
07Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- Si applicano gli accordi con terze parti
- Sì
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