HROG06 T0 M2

HROG06 T0 M2 est une lignée cellulaire de glioblastome multiforme (GBM) humain primaire établie à partir de tissu tumoral fraîchement réséqué chez un patient adulte chez qui un glioblastome de grade IV selon la classification de l’OMS avait été diagnostiqué. La désignation « T0 » indique que l’échantillon tumoral a été prélevé lors de la première intervention chirurgicale, tandis que « M2 » fait référence au deuxième modèle in vitro généré de manière indépendante à partir de la même tumeur primaire. La lignée cellulaire a été développée au sein de la plateforme HROG (Hansestadt Rostock Glioma), qui se consacre à la production de cultures de gliomes à très faible nombre de passages préservant les caractéristiques biologiques et moléculaires de la tumeur d’origine du patient.

La lignée HROG06 T0 M2 se développe en adhésion dans des conditions de culture normalisées et présente une morphologie fusiforme de type fibroblastique, typique des cultures primaires de GBM. Les analyses immunophénotypiques menées sur l’ensemble de la série HROG démontrent l’expression de marqueurs des lignées neurales et gliales, tels que la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP), la nestine et la vimentine, ce qui corrobore l’origine astrocytaire de la tumeur. La caractérisation moléculaire au sein de la plateforme HROG comprend l’évaluation de biomarqueurs cliniquement pertinents, tels que le statut de méthylation du promoteur MGMT, l’amplification de l’EGFR et le profilage mutationnel de gènes incluant TP53, IDH1/2, KRAS et BRAF, confirmant la préservation des altérations génomiques associées à la tumeur dans les cultures à passages précoces.

La lignée HROG06 T0 M2 a été utilisée pour l’évaluation in vitro des réponses thérapeutiques aux traitements de référence du glioblastome, y compris les agents chimiothérapeutiques alkylants ainsi que les inhibiteurs ciblés. Des analyses comparatives au sein de la collection HROG indiquent une morphologie stable, une cinétique de croissance reproductible et des profils de sensibilité aux médicaments cohérents dès les premiers passages, ce qui confirme son adéquation en tant que modèle de recherche translationnelle. En tant que lignée cellulaire de GBM dérivée d’un patient et à faible nombre de passages, HROG06 T0 M2 offre une plateforme cliniquement pertinente pour l’étude de la biologie du glioblastome, de l’hétérogénéité tumorale et des mécanismes de résistance au traitement.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.