Gå direkt till innehållet
HROG06 T0 M2
Vävnad
Hjärna
Sjukdom
Glioblastom

HROG06 T0 M2

Cell line · Produktnummer 300883

HROG06 T0 M2 är en primär mänsklig glioblastoma multiforme (GBM)-cellinje som etablerats från nyligen resekterad tumörvävnad från en vuxen patient som diagnostiserats med ...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

HROG06 T0 M2 är en primär human glioblastoma multiforme (GBM)-cellinje som etablerats från nyligen resekterad tumörvävnad från en vuxen patient som diagnostiserats med WHO-grad IV glioblastom. Beteckningen ”T0” indikerar att tumörprovet erhölls vid det initiala kirurgiska ingreppet, medan ”M2” avser den andra oberoende genererade in vitro-modellen som härrör från samma primära tumör. Cellinjen utvecklades inom HROG-plattformen (Hansestadt Rostock Glioma), som fokuserar på att generera gliomkulturer med extremt låg passage som bevarar de biologiska och molekylära egenskaperna hos patientens ursprungliga tumör.

HROG06 T0 M2 växer vidhäftande under standardiserade odlingsförhållanden och uppvisar en spindelformad, fibroblastliknande morfologi som är typisk för primära GBM-odlingar. Immunofenotypiska analyser över HROG-serien visar uttryck av neurala och gliala linjemarkörer såsom glialt fibrillära surt protein (GFAP), nestin och vimentin, vilket stöder astrocytisk tumörursprung. Molekylär karakterisering inom HROG-plattformen inkluderar bedömning av kliniskt relevanta biomarkörer såsom MGMT-promotormetyleringsstatus, EGFR-amplifiering och mutationsprofilering av gener inklusive TP53, IDH1/2, KRAS och BRAF, vilket bekräftar bevarandet av tumörassocierade genomiska förändringar i tidiga passageodlingar.

HROG06 T0 M2 har använts för in vitro-utvärdering av terapeutiska svar på standardbehandlingar av glioblastom, inklusive alkylerande kemoterapeutiska medel samt målinriktade hämmare. Jämförande analyser inom HROG-samlingen indikerar stabil morfologi, reproducerbar tillväxtkinetik och konsistenta läkemedelskänslighetsprofiler i tidiga passager, vilket stöder dess lämplighet som en translationell forskningsmodell. Som en patienthärledd GBM-cellinje med låg passage ger HROG06 T0 M2 en kliniskt relevant plattform för att studera glioblastombiologi, tumörheterogenitet och mekanismer för behandlingsresistens.

Vävnad
Hjärna
Sjukdom
Glioblastom

02Klassificering

Organism
Människa
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Identifierare

Källa
HROG06 T0 M2 (Cytion katalognummer 300883)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FP

04Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

06Donator

Etnicitet
Kaukasisk