HROG06 T0 M2
Cell line · Tuotenumero 300883
HROG06 T0 M2 on primaarinen ihmisen glioblastoma multiforme (GBM) -solulinja, joka on peräisin vasta poistetusta kasvainkudoksesta aikuiselta potilaalta, jolla oli diagnosoitu ...
Räätälöinti / Suositukset
- HROG06 T0 M2Cell line€800.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
HROG06 T0 M2 on primaarinen ihmisen glioblastoma multiforme (GBM) -solulinja, joka on perustettu WHO:n luokituksen IV glioblastoomaksi diagnosoidun aikuispotilaan tuoreesta resektoidusta kasvainkudoksesta. Merkintä ”T0” tarkoittaa, että kasvainnäyte on otettu ensimmäisen kirurgisen toimenpiteen yhteydessä, kun taas ”M2” viittaa toiseen itsenäisesti luotuun in vitro -malliin, joka on peräisin samasta primaarikasvaimesta. Solulinja on kehitetty HROG (Hansestadt Rostock Glioma) -alustalla, joka keskittyy luomaan erittäin vähän passitoituja glioomakulttuureja, jotka säilyttävät alkuperäisen potilaan kasvaimen biologiset ja molekyyliset ominaisuudet.
HROG06 T0 M2 kasvaa tarttuvasti standardoiduissa viljelyolosuhteissa ja osoittaa primaarisille GBM-viljelmille tyypillistä sukkulamaisen, fibroblastien kaltaista morfologiaa. HROG-sarjan immunofenotyyppiset analyysit osoittavat hermosolujen ja glia-solujen markkereiden, kuten glia-solujen fibrillaarisen happaman proteiinin (GFAP), nestinin ja vimentiinin, ilmentymisen, mikä tukee astrosyyttisen kasvaimen alkuperää. HROG-alustan molekyylinen karakterisointi sisältää kliinisesti merkittävien biomarkkerien, kuten MGMT-promoottorin metylaatiotilan, EGFR-amplifikaation ja TP53-, IDH1/2-, KRAS- ja BRAF-geenien mutaatioprofiilien arvioinnin, mikä vahvistaa kasvaimeen liittyvien genomimuutosten säilyvyyden varhaisissa viljelmissä.
HROG06 T0 M2:ta on käytetty in vitro -arviointiin terapeuttisista vasteista glioblastooman standardihoitoihin, mukaan lukien alkyloivat kemoterapeuttiset aineet sekä kohdennetut estäjät. HROG-kokoelman sisällä tehdyt vertailevat analyysit osoittavat stabiilin morfologian, toistettavan kasvukineettisen ja yhdenmukaiset lääkeherkkyysprofiilit varhaisissa soluviljelmissä, mikä tukee sen sopivuutta translaationaalisena tutkimusmallina. Potilaasta peräisin olevana, matalan soluviljelmän GBM-solulinjana HROG06 T0 M2 tarjoaa kliinisesti merkittävän alustan glioblastooman biologian, kasvaimen heterogeenisyyden ja hoidon resistenssimekanismien tutkimiseen.
- Kudos
- Aivot
- Sairaus
- Glioblastooma
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Tunnisteet
- Lähdeviite
- HROG06 T0 M2 (Cytionin luettelonumero 300883)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FP
04Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme 50 % perusmediaa + 40 % FBS + 10 % DMSO:ta eli CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytysstressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
06Lahjoittaja
- Etnisyys
- Kaukasialainen
07Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Sovelletaan kolmansien osapuolten kanssa tehtyjä sopimuksia
- Kyllä
.jpg)