Prejsť na obsah
HROG06 T0 M2
Tkanivo
Mozog
Choroba
Glioblastóm

Dokumenty

HROG06 T0 M2

Cell line · Číslo výrobku 300883

HROG06 T0 M2 je primárna ľudská bunková línia glioblastómu multiforme (GBM), získaná z čerstvo odstránenej nádorovej tkanivovej vzorky dospelého pacienta s diagnózou ...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

HROG06 T0 M2 je primárna ľudská bunková línia glioblastoma multiforme (GBM) vytvorená z čerstvo odstráneného nádorového tkaniva dospelého pacienta s diagnózou glioblastomu stupňa IV podľa WHO. Označenie „T0“ znamená, že vzorka nádoru bola odobratá pri počiatočnom chirurgickom zákroku, zatiaľ čo „M2“ sa vzťahuje na druhý nezávisle vytvorený in vitro model odvodený z toho istého primárneho nádoru. Bunka bola vyvinutá v rámci platformy HROG (Hansestadt Rostock Glioma), ktorá sa zameriava na vytváranie kultúr gliómov s ultra nízkym počtom pasáží, ktoré zachovávajú biologické a molekulárne charakteristiky pôvodného nádoru pacienta.

HROG06 T0 M2 rastie adhezívne za štandardných kultivačných podmienok a vykazuje vretenovitú morfológiu podobnú fibroblastom, typickú pre primárne kultúry GBM. Imunofenotypové analýzy v rámci série HROG preukazujú expresiu markerov neurálnej a gliálnej línie, ako sú gliálny fibrilárny kyselý proteín (GFAP), nestín a vimentín, čo potvrdzuje astrocytárny pôvod nádoru. Molekulárna charakterizácia v rámci platformy HROG zahŕňa hodnotenie klinicky relevantných biomarkerov, ako je stav metylácie promotora MGMT, amplifikácia EGFR a mutačné profilovanie génov vrátane TP53, IDH1/2, KRAS a BRAF, čo potvrdzuje zachovanie genomických zmien spojených s nádorom v kultúrach s nízkym počtom pasáží.

HROG06 T0 M2 sa používa na in vitro hodnotenie terapeutických reakcií na štandardnú liečbu glioblastómu, vrátane alkylujúcich chemoterapeutických látok, ako aj cielených inhibítorov. Porovnávacie analýzy v rámci kolekcie HROG ukazujú stabilnú morfológiu, reprodukovateľnú kinetiku rastu a konzistentné profily citlivosti na lieky v raných pasážach, čo potvrdzuje jej vhodnosť ako translačného výskumného modelu. Ako bunka GBM s nízkym počtom pasáží odvodená od pacienta poskytuje HROG06 T0 M2 klinicky relevantnú platformu na štúdium biológie glioblastómu, heterogenity nádorov a mechanizmov rezistencie na liečbu.

Tkanivo
Mozog
Choroba
Glioblastóm

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citácia
HROG06 T0 M2 (katalógové číslo Cytion 300883)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FP

04Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 50 % bazálne médium + 40 % FBS + 10 % DMSO alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

06Darca

Etnická príslušnosť
Kaukazský