Tartalomra ugrás
HROG06 T0 M2
Szövet
Agy
Betegség
Glioblastoma

Dokumentumok

HROG06 T0 M2

Cell line · Termékszám 300883

A HROG06 T0 M2 egy elsődleges humán glioblastoma multiforme (GBM) sejtvonal, amelyet egy … diagnózissal rendelkező felnőtt beteg frissen eltávolított daganatos szövetéből állítottak elő…

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A HROG06 T0 M2 egy elsődleges humán glioblastoma multiforme (GBM) sejtvonal, amelyet egy WHO IV. fokozatú glioblastomával diagnosztizált felnőtt beteg frissen eltávolított tumoros szövetéből hoztak létre. A „T0” jelölés azt jelzi, hogy a tumor mintát az első műtéti beavatkozás során vették, míg az „M2” jelölés ugyanazon elsődleges tumorból származó, függetlenül létrehozott második in vitro modellre utal. A sejtvonalat a HROG (Hansestadt Rostock Glioma) platformon belül fejlesztették ki, amely az eredeti beteg tumorának biológiai és molekuláris jellemzőit megőrző, rendkívül alacsony passzálási számú glióma kultúrák létrehozására összpontosít.

A HROG06 T0 M2 standardizált tenyésztési körülmények között tapadósan növekszik, és az elsődleges GBM-tenyészetekre jellemző orsó alakú, fibroblaszt-szerű morfológiát mutat. A HROG-sorozat immunfenotípus-elemzései olyan ideg- és glia-vonalbeli markerek expresszióját mutatják, mint a glia fibrilláris savas fehérje (GFAP), a nestin és a vimentin, ami alátámasztja az asztrocitás tumor eredetét. A HROG platformon belüli molekuláris jellemzés magában foglalja a klinikailag releváns biomarkerek, például az MGMT promóter metilációs státusza, az EGFR amplifikációja és a TP53, IDH1/2, KRAS és BRAF gének mutációs profiljának értékelését, megerősítve a tumorral kapcsolatos genomikus változások megőrződését a korai passzázsú tenyészetekben.

A HROG06 T0 M2-t a standard glioblastoma-kezelésekre adott terápiás válaszok in vitro értékelésére használták, beleértve az alkilező kemoterápiás szereket és a célzott inhibitorokat. A HROG gyűjteményen belüli összehasonlító elemzések stabil morfológiát, reprodukálható növekedési kinetikát és konzisztens gyógyszerérzékenységi profilokat mutatnak a korai passzázsokban, alátámasztva alkalmasságát transzlációs kutatási modellként. Betegektől származó, alacsony passzázsú GBM sejtvonalaként a HROG06 T0 M2 klinikailag releváns platformot biztosít a glioblastoma biológiájának, a tumor heterogenitásának és a kezelésrezisztencia mechanizmusainak tanulmányozásához.

Szövet
Agy
Betegség
Glioblastoma

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Azonosítók

Hivatkozás
HROG06 T0 M2 (Cytion katalógusszám: 300883)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FP

04Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

06Adományozó

Etnikai hovatartozás
Kaukázusi