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HROG06 T0 M2
Cell line · Product number 300883
HROG06 T0 M2 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with ...
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01General information
- Description
HROG06 T0 M2 是一株源自一名被診斷為世界衛生組織（WHO）第四級膠質母細胞瘤之成人患者，其新鮮切除腫瘤組織所建立的原發性人類多形性膠質母細胞瘤（GBM）細胞系。 「T0」的標示表示該腫瘤標本取自首次手術，而「M2」則指由同一原發性腫瘤衍生、獨立建立的第二個體外模型。 該細胞系是在 HROG（漢薩城市羅斯托克膠質瘤）平台內開發的，該平台專注於建立能保留原始患者腫瘤生物學和分子特徵的超低傳代次數膠質瘤培養物。
HROG06 T0 M2 在標準化培養條件下呈貼壁生長，並呈現原發性膠質母細胞瘤培養物典型的紡錘形、成纖維細胞樣形態。 對 HROG 系列進行的免疫表型分析顯示，該細胞系表達神經和膠質細胞譜系標記物，例如膠質纖維酸性蛋白 (GFAP)、nestin 和 vimentin，這支持了其源自星形膠質細胞腫瘤的觀點。 HROG 平台內的分子特徵分析包括評估臨床相關的生物標記，例如 MGMT 啟動子甲基化狀態、EGFR 擴增，以及 TP53、IDH1/2、KRAS 和 BRAF 等基因的突變分析，從而證實早期傳代培養中保留了與腫瘤相關的基因組改變。
HROG06 T0 M2 已被用於體外評估對膠質母細胞瘤標準治療方案的治療反應，包括烷化類化療藥物以及標靶抑制劑。 HROG 系列內的比較分析顯示，該細胞系在早期傳代時具有穩定的形態、可重複的生長動力學以及一致的藥物敏感性特徵，這支持其作為轉譯研究模型的適用性。 作為源自患者且傳代次數較低的膠質母細胞瘤（GBM）細胞系，HROG06 T0 M2 為研究膠質母細胞瘤生物學、腫瘤異質性及治療耐藥機制提供了具有臨床相關性的平台。
- Tissue
- 大腦
- Disease
- 膠質母細胞瘤
02Classification
- Organism
- Human
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- HROG06 T0 M2（Cytion 型號 300883）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FP
04Handling and culture
- Culture medium
- DMEM：Ham's F12（1:1），重量比：3.1 g/L 葡萄糖，重量比：2.5 mM L-谷氨酰胺，重量比：15 mM HEPES， w: 0.5 mM 丙酮酸鈉，w: 1.2 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820400a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用 50% 基礎培養基 + 40% 胎牛血清 (FBS) + 10% 二甲基亞砜 (DMSO)，或 CM-1（Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提高細胞存活率並減輕冷凍引起的應激。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
06Donor
- Ethnicity
- 高加索人
07Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Third-party agreements apply
- Yes