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C8166
Tissu
Sang du cordon ombilical
Synonymes
C8166-CD4

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C8166

Cell line · Référence du produit 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire C8166 est une lignée de lymphocytes T transformée par le virus de la leucémie à cellules T humaines de type 1 (HTLV-1) ; elle est largement utilisée dans la recherche sur les infections rétrovirales, en particulier le VIH et l'HTLV. Initialement obtenues par fusion de lymphocytes du sang du cordon ombilical avec des lymphocytes T provenant de patients atteints de leucémie ou de lymphome, les cellules C8166 conservent le génome de l'HTLV-1 et expriment l'ARN viral sans produire de particules infectieuses de l'HTLV-1. Cette lignée cellulaire se distingue par sa forte sensibilité à l’infection par le VIH-1, illustrée par la formation de syncytes — de grandes cellules multinucléées résultant de l’activité de fusion virale —, ce qui en fait un modèle robuste pour les études sur la pathogenèse du VIH et les effets cytopathiques in vitro.

Les cellules C8166 ont été largement utilisées dans des études portant sur les fonctions et les interactions des gènes viraux, comme la protéine R (Vpr) du VIH-1, capable d’induire un arrêt du cycle cellulaire en phase G2/M et l’apoptose dans les lymphocytes T infectés. Il a été démontré que l’introduction de la protéine Vpr dans les cellules C8166 active les voies apoptotiques liées aux caspases, ce qui souligne son potentiel en tant que cible dans les études sur l’apoptose liée au VIH et les thérapies antivirales. De plus, l’expression par les cellules C8166 de marqueurs de surface spécifiques et leur sensibilité à l’entrée et à la réplication du VIH-1 en font un outil précieux pour évaluer les effets des inhibiteurs sur la réplication du VIH et les réponses cellulaires dans différentes conditions, y compris dans des milieux sans sérum dont il a été démontré qu’ils modifient les niveaux d’expression de certains récepteurs et diminuent l’infectivité du VIH au fil du temps.

L’adaptabilité et la sensibilité de cette lignée cellulaire au VIH et au HTLV-1 constituent un système dynamique pour la recherche en virologie et en immunologie, en particulier pour la compréhension de la latence virale, des mécanismes de réplication et des interventions thérapeutiques potentielles ciblant les infections virales dans les lymphocytes T.

Tissu
Sang du cordon ombilical
Synonymes
  • C8166-CD4

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
De type lymphoblaste
Type de cellule
Lymphoblastoïde

04Identifiants

Référence
C8166 (référence Cytion 305528)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Repiquage
Rassembler les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et laver délicatement les cellules adhérentes avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium (utiliser 3-5 ml pour les flacons T25 et 5-10 ml pour les flacons T75). Appliquer Accutase (1-2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à couvrir entièrement la couche cellulaire. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l'incubation, combiner et centrifuger la suspension et les cellules adhérentes. Après centrifugation, remettre soigneusement en suspension le culot cellulaire et transférer la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Densité de semis
2 à 4 × 10⁵ cellules/mL
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
Nouveau-né
Origine ethnique
Caucasien