C8166
Cell line · Product number 305528
The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...
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01General information
- Description
C8166 細胞系是一種經由人類 T 細胞白血病病毒 1 型（HTLV-1）轉化的 T 細胞系，廣泛應用於逆轉錄病毒感染的研究，尤其是 HIV 和 HTLV 的研究。 C8166 細胞最初是透過將臍帶血淋巴細胞與白血病-淋巴瘤患者的 T 細胞融合而衍生，該細胞保留了 HTLV-1 基因組並表達病毒 RNA，但不會產生具傳染性的 HTLV-1 顆粒。 該細胞系因對 HIV-1 感染高度易感而著稱，這體現在合胞體的形成上——即由病毒融合活性所產生的大型多核細胞，使其成為研究 HIV 病理機制及體外細胞病變效應的可靠模型。
C8166 細胞已被廣泛應用於研究病毒基因的功能與相互作用，例如 HIV-1 病毒蛋白 R（Vpr），該蛋白可誘導受感染的 T 細胞發生 G2/M 期細胞週期停滯及細胞凋亡。 研究顯示，將 Vpr 導入 C8166 細胞可激活半胱天冬酶相關的凋亡途徑，這表明其具有成為 HIV 相關凋亡研究及抗病毒療法靶點的潛力。 此外，C8166 細胞對特定表面標記物的表達，以及對 HIV-1 侵入與複製的敏感性，使其成為評估抑制劑在不同條件下對 HIV 複製及細胞反應影響的寶貴工具，包括無血清培養基——研究顯示，該培養基會改變某些受體的表達水平，並隨時間推移降低 HIV 的感染性。
該細胞系對 HIV 和 HTLV-1 的適應性與敏感性，為病毒學與免疫學研究提供了一個動態系統，特別是對於理解病毒潛伏、複製機制，以及針對 T 細胞病毒感染的潛在治療干預措施。
- Tissue
- 臍帶血
- Synonyms
- C8166-CD4
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- 淋巴母細胞樣
- Cell type
- 淋巴母細胞樣
04Identifiers
- Citation
- C8166（Cytion 型號 305528）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1099
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺，含 2.0 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820700a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Subculturing
- 將懸浮細胞收集至 15 毫升試管中，並用不含鈣和鎂的 PBS 輕柔地洗滌貼壁細胞（T25 培養瓶使用 3-5 毫升，T75 培養瓶使用 5-10 毫升）。 加入 Accutase（T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶使用 2.5 毫升），確保完全覆蓋細胞層。讓細胞於室溫下孵育 10 分鐘。 孵育完成後，將懸浮細胞與貼壁細胞合併並進行離心。離心後，小心地將細胞沉澱重新懸浮，並將細胞懸液轉移至裝有新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 2-4 × 10⁵ 個細胞/毫升
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 新生兒
- Ethnicity
- 高加索人
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes