Mine otse sisu juurde
C8166
Kude
Nabanööri veri
Sünonüümid
C8166-CD4

Dokumendid

C8166

Cell line · Toote number 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin C8166 on inimese T-rakkude leukeemia viiruse tüübi 1 (HTLV-1) poolt transformeeritud T-rakkude liin, mida kasutatakse laialdaselt retroviirusnakkuste, eelkõige HIV-i ja HTLV-i uurimisel. C8166-rakud, mis saadi algselt nabanööri vere lümfotsüütide ja leukeemia-lümfoomiga patsientide T-rakkude ühendamise teel, säilitavad HTLV-1 genoomi ja ekspresseerivad viiruslikku RNA-d, ilma et toodaksid nakkavaid HTLV-1 osakesi. See rakuliin paistab silma oma suure vastuvõtlikkusega HIV-1-nakkusele, mida näitab süntsüütide moodustumine – suured, mitmetuumalised rakud, mis tekivad viiruse fusioonitegevuse tulemusena, muutes selle tugevaks mudeliks HIV patogeneesi ja tsütopaatiliste mõjude uurimiseks in vitro.

C8166-rakke on laialdaselt kasutatud uuringutes, milles uuritakse viirusgeenide funktsioone ja vastastikmõjusid, näiteks HIV-1 viirusvalku R (Vpr), mis võib nakatunud T-rakkudes esile kutsuda G2/M-rakutsükli seiskumise ja apoptoosi. On näidatud, et Vpr-i sisseviimine C8166-rakkudesse aktiveerib kaspaasiga seotud apoptootilisi signaalradasid, mis viitab selle potentsiaalile sihtmärgina HIV-ga seotud apoptoosi uuringutes ja viirusevastastes ravimeetodites. Lisaks muudavad C8166-rakkude spetsiifiliste pinnamarkerite ekspressioon ning tundlikkus HIV-1 sisenemise ja replikatsiooni suhtes need väärtuslikuks vahendiks inhibiitorite mõju hindamisel HIV-replikatsioonile ja rakulistele reaktsioonidele erinevates tingimustes, sealhulgas seerumivabas keskkonnas, mis on näidanud, et see muudab teatud retseptorite ekspressioonitasemeid ja vähendab aja jooksul HIV-i nakkavust.

Selle rakuliini kohanemisvõime ja tundlikkus HIV-i ja HTLV-1 suhtes pakuvad dünaamilist süsteemi viroloogia- ja immunoloogiauuringuteks, eriti viirusliku latentsuse, replikatsioonimehhanismide ja T-rakkudes esinevaid viirusinfektsioone sihtivate potentsiaalsete terapeutiliste sekkumiste mõistmiseks.

Kude
Nabanööri veri
Sünonüümid
  • C8166-CD4

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastilaadsed
Rakutüüp
Lümfoblastoid

04Tunnused

Viide
C8166 (Cytioni katalooginumber 305528)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
2–4 × 10⁵ rakku/ml
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Vastsündinu
Etniline kuuluvus
Kaukaasia