Pereiti prie turinio
C8166
Audinys
Naujakūgio virkštelės kraujas
Sinonimai
C8166-CD4

Dokumentai

C8166

Cell line · Prekės numeris 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

C8166 ląstelių linija yra žmogaus T-ląstelių leukemijos viruso 1 tipo (HTLV-1) transformuota T-ląstelių linija, kuri plačiai naudojama retrovirusinių infekcijų, ypač ŽIV ir HTLV, tyrimuose. Iš pradžių gautos sujungus virkštelės kraujo limfocitus su T-ląstelėmis, paimtomis iš leukemijos ir limfomos pacientų, C8166 ląstelės išlaiko HTLV-1 genomą ir ekspresuoja virusinę RNR, tačiau nesukuria infekcinių HTLV-1 dalelių. Ši ląstelių linija išsiskiria dideliu jautrumu ŽIV-1 infekcijai, kurį rodo sincitų susidarymas – didelės, daugiabranduolės ląstelės, susidarančios dėl virusinės susijungimo veiklos, todėl ji yra patikimas modelis ŽIV patogenezės ir citopatinių poveikių tyrimams in vitro.

C8166 ląstelės plačiai naudojamos tyrimuose, kuriuose nagrinėjamos virusinių genų funkcijos ir sąveikos, pavyzdžiui, ŽIV-1 viruso baltymo R (Vpr), kuris gali sukelti G2/M ląstelių ciklo sustabdymą ir apoptozę užkrėstose T ląstelėse. Įrodyta, kad Vpr įvedimas į C8166 ląsteles aktyvuoja su kaspazėmis susijusius apoptozės kelius, o tai rodo jo potencialą kaip taikinio ŽIV susijusiuose apoptozės tyrimuose ir antivirusiniuose gydymuose. Be to, C8166 ląstelių specifinių paviršiaus žymenų ekspresija ir jautrumas ŽIV-1 patekimui bei replikacijai leidžia jas naudoti vertinant inhibitorių poveikį ŽIV replikacijai ir ląstelių reakcijoms įvairiomis sąlygomis, įskaitant beserumines terpes, kurios, kaip įrodyta, keičia tam tikrų receptorių ekspresijos lygį ir laikui bėgant mažina ŽIV infekcingumą.

Šios ląstelių linijos prisitaikymo gebėjimas ir jautrumas ŽIV bei HTLV-1 sudaro dinamišką sistemą virusologijos ir imunologijos tyrimams, ypač siekiant suprasti virusų latentiškumą, replikacijos mechanizmus ir galimas terapines intervencijas, nukreiptas prieš virusines infekcijas T-ląstelėse.

Audinys
Naujakūgio virkštelės kraujas
Sinonimai
  • C8166-CD4

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į limfoblastus panašus
Ląstelių tipas
Limfoblastoidinis

04Identifikatoriai

Nuoroda
C8166 (Cytion katalogo numeris 305528)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Surinkite ląstelių suspensiją į 15 ml mėgintuvėlį ir švelniai nuplaukite prilipusias ląsteles PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio (naudokite 3-5 ml T25 kolboms ir 5-10 ml T75 kolboms). Užtepkite "Accutase" (1-2 ml T25 kolboms, 2,5 ml T75 kolboms), kad visiškai padengtumėte ląstelių sluoksnį. Leiskite ląstelėms 10 minučių inkubuotis kambario temperatūroje. Po inkubacijos sumaišykite ir centrifuguokite suspensiją ir prilipusias ląsteles. Po centrifugavimo atsargiai resuspenduokite ląstelių granules ir perkelkite ląstelių suspensiją į naujas kolbas su šviežia terpe.
Sėjos tankis
2–4 × 10⁵ ląstelių/ml
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
Naujagimis
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių