Премини към съдържанието
C8166
Тъкан
Кръв от пъпната връв
Синоними
C8166-CD4

Документи

C8166

Cell line · Номер на продукта 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия C8166 е Т-клетъчна линия, трансформирана от вируса на човешката Т-клетъчна левкемия тип 1 (HTLV-1), и се използва широко в изследванията върху ретровирусни инфекции, по-специално ХИВ и HTLV. Първоначално получени чрез сливане на лимфоцити от кръвта от пъпната връв с Т-клетки от пациенти с левкемия и лимфом, клетките C8166 запазват генома на HTLV-1 и експресират вирусна РНК, без да произвеждат инфекциозни частици на HTLV-1. Тази клетъчна линия се отличава с висока податливост към инфекция с HIV-1, което се проявява чрез образуването на синцитии – големи, многоядрени клетки, резултат от вирусната фузионна активност, което я превръща в надежден модел за изследвания на патогенезата на HIV и цитопатичните ефекти in vitro.

Клетките C8166 са широко използвани в изследвания, проучващи функциите и взаимодействията на вирусните гени, като например вирусния протеин R (Vpr) на HIV-1, който може да предизвика спиране на клетъчния цикъл в фаза G2/M и апоптоза в заразените Т-клетки. Доказано е, че въвеждането на Vpr в клетките C8166 активира апоптотични пътища, свързани с каспазите, което показва потенциала му като мишена в проучвания на апоптозата, свързана с ХИВ, и антивирусни терапии. Освен това експресията на специфични повърхностни маркери от C8166 и чувствителността ѝ към проникването и репликацията на HIV-1 я правят ценна за оценка на ефектите на инхибиторите върху репликацията на HIV и клетъчните реакции при различни условия, включително в безсерумни среди, за които е доказано, че променят нивата на експресия на определени рецептори и намаляват инфекциозността на HIV с течение на времето.

Адаптивността и чувствителността на тази клетъчна линия към ХИВ и HTLV-1 осигуряват динамична система за изследвания в областта на вирусологията и имунологията, особено за разбиране на вирусната латентност, механизмите на репликация и потенциалните терапевтични интервенции, насочени към вирусните инфекции в Т-клетките.

Тъкан
Кръв от пъпната връв
Синоними
  • C8166-CD4

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Лимфобластно-подобни
Тип клетка
Лимфобластоиден

04Идентификатори

Източник
C8166 (каталожен номер на Cytion 305528)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1099

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Пресаждане
Съберете суспендираните клетки в 15-милилитрова епруветка и внимателно промийте прилепналите клетки с PBS без калций и магнезий (използвайте 3-5 ml за колби Т25 и 5-10 ml за колби Т75). Нанесете Accutase (1-2 ml за колби T25 и 2,5 ml за колби T75), като се уверите, че покрива изцяло клетъчния слой. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 10 минути. След инкубацията комбинирайте и центрофугирайте суспензията и адхезивните клетки. След центрофугирането внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета и прехвърлете клетъчната суспензия в нови колби, съдържащи свежа среда.
Плътност на засяването
2–4 × 10⁵ клетки/мл
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
Новородено
Етническа принадлежност
Кавказки