Pāriet uz saturu
C8166
Audums
Nabas saites asinis
Sinonīmi
C8166-CD4

Dokumenti

C8166

Cell line · Preces numurs 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

C8166 šūnu līnija ir T-šūnu līnija, kas transformēta ar cilvēka T-šūnu leikēmijas vīrusu 1. tipa (HTLV-1), un to plaši izmanto pētījumos par retrovirālu infekciju, jo īpaši HIV un HTLV. Sākotnēji iegūtas, sapludinot nabassaites asins limfocītus ar T-šūnām no leikēmijas un limfomas pacientiem, C8166 šūnas saglabā HTLV-1 genomu un ekspresē vīrusu RNS, neradot infekciozas HTLV-1 daļiņas. Šī šūnu līnija izceļas ar augstu uzņēmību pret HIV-1 infekciju, ko apliecina sincitiju veidošanās — lielas, daudzkodolu šūnas, kas rodas vīrusa saplūšanas rezultātā, tādējādi padarot to par uzticamu modeli pētījumiem par HIV patogēnēzi un citopātiskajiem efektiem in vitro.

C8166 šūnas ir plaši izmantotas pētījumos, kuros izpēta vīrusu gēnu funkcijas un mijiedarbību, piemēram, HIV-1 vīrusu proteīnu R (Vpr), kas inficētās T šūnās var izraisīt G2/M šūnu cikla apstāšanos un apoptozi. Ir pierādīts, ka Vpr ievadīšana C8166 šūnās aktivizē ar kaspāzēm saistītus apoptozes ceļus, liecinot par tā potenciālu kā mērķa molekulu HIV saistītos apoptozes pētījumos un pretvīrusu terapijās. Turklāt C8166 šūnu specifisko virsmas marķieru ekspresija un jutība pret HIV-1 iekļūšanu un replikāciju padara tās vērtīgas, lai novērtētu inhibitoru ietekmi uz HIV replikāciju un šūnu reakcijām dažādos apstākļos, tostarp bezseruma barotnēs, par kurām ir pierādīts, ka tās laika gaitā maina noteiktu receptoru ekspresijas līmeņus un samazina HIV infekciozitāti.

Šīs šūnu līnijas pielāgošanās spēja un jutība pret HIV un HTLV-1 nodrošina dinamisku sistēmu pētījumiem viroloģijā un imunoloģijā, jo īpaši, lai izprastu vīrusu latences stāvokli, replikācijas mehānismus un potenciālas terapeitiskas intervences, kas vērstas pret vīrusu infekcijām T-šūnās.

Audums
Nabas saites asinis
Sinonīmi
  • C8166-CD4

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Limfoblastoīds

04Identifikatori

Atsauce
C8166 (Cytion kataloga numurs 305528)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁵ šūnu/ml
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Jaundzimušais
Etniskā piederība
Kaukāzietis