Gå direkte til indholdet
C8166
Væv
Navlestrengsblod
Synonymer
C8166-CD4

Dokumenter

C8166

Cell line · Varenummer 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

C8166-cellelinjen er en T-cellelinje, der er transformeret af humant T-celle-leukæmi-virus type 1 (HTLV-1), og den anvendes i vid udstrækning i forskning i retrovirale infektioner, især HIV og HTLV. C8166-cellerne, der oprindeligt blev fremstillet ved at fusionere lymfocytter fra navlestrengsblod med T-celler fra patienter med leukæmi og lymfom, bevarer HTLV-1-genomet og udtrykker viralt RNA uden at producere infektiøse HTLV-1-partikler. Denne cellelinje er kendt for sin høje modtagelighed for HIV-1-infektion, hvilket kommer til udtryk ved dannelsen af syncytier – store, flerkernede celler, der opstår som følge af viral fusionsaktivitet – hvilket gør den til en robust model for studier af HIV-patogenese og cytopatiske effekter in vitro.

C8166-celler er blevet anvendt i vid udstrækning i undersøgelser af virale genfunktioner og interaktioner, såsom det virale HIV-1-protein R (Vpr), som kan inducere G2/M-cellecyklusstop og apoptose i inficerede T-celler. Det er påvist, at introduktion af Vpr i C8166-celler aktiverer caspase-relaterede apoptotiske signalveje, hvilket peger på dets potentiale som mål i HIV-relaterede apoptoseundersøgelser og antivirale behandlinger. Derudover gør C8166-cellernes ekspression af specifikke overflademarkører og følsomhed over for HIV-1-indtrængning og -replikation dem værdifulde til evaluering af hæmmeres virkning på HIV-replikation og cellulære responser under forskellige betingelser, herunder serumfrie medier, som har vist sig at ændre ekspressionsniveauerne for visse receptorer og mindske HIV-infektiviteten over tid.

Denne cellelinjes tilpasningsevne og følsomhed over for HIV og HTLV-1 udgør et dynamisk system til forskning inden for virologi og immunologi, især med henblik på at forstå viral latens, replikationsmekanismer og potentielle terapeutiske interventioner rettet mod virusinfektioner i T-celler.

Væv
Navlestrengsblod
Synonymer
  • C8166-CD4

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast-lignende
Celletype
Lymfoblastoid

04Identifikatorer

Kildehenvisning
C8166 (Cytion-katalognummer 305528)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Oddyrkning
Saml de suspenderede celler i et 15 ml rør, og vask forsigtigt de klæbende celler med PBS uden calcium og magnesium (brug 3-5 ml til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml til T25-kolber, 2,5 ml til T75-kolber) for at sikre fuld dækning af cellelaget. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 10 minutter. Efter inkubationen kombineres og centrifugeres både suspensionen og de vedhæftede celler. Efter centrifugering resuspenderes cellepelleten forsigtigt, og cellesuspensionen overføres til nye kolber, der indeholder frisk medium.
Såtæthed
2–4 × 10⁵ celler/ml
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
Nyfødt
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk