C8166
Cell line · Numer produktu 305528
The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...
Dostosowanie / Zalecenia
- C8166Cell line€550.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa C8166 to linia komórek T transformowana przez wirusa białaczki komórek T człowieka typu 1 (HTLV-1), szeroko wykorzystywana w badaniach nad zakażeniami retrowirusowymi, zwłaszcza HIV i HTLV. Komórki C8166, uzyskane początkowo poprzez fuzję limfocytów z krwi pępowinowej z komórkami T pochodzącymi od pacjentów z białaczką lub chłoniakiem, zachowują genom HTLV-1 i ulegają ekspresji wirusowego RNA, nie wytwarzając jednak zakaźnych cząstek HTLV-1. Linia ta wyróżnia się wysoką podatnością na zakażenie wirusem HIV-1, czego dowodem jest tworzenie syncytii – dużych, wielojądrowych komórek powstających w wyniku aktywności fuzji wirusowej, co czyni ją solidnym modelem do badań nad patogenezą HIV i efektami cytopatycznymi in vitro.
Komórki C8166 są szeroko wykorzystywane w badaniach dotyczących funkcji i interakcji genów wirusowych, takich jak białko wirusowe R (Vpr) wirusa HIV-1, które może indukować zatrzymanie cyklu komórkowego w fazie G2/M oraz apoptozę w zakażonych komórkach T. Wykazano, że wprowadzenie białka Vpr do komórek C8166 aktywuje szlaki apoptyczne związane z kaspazami, co wskazuje na jego potencjał jako celu w badaniach nad apoptozą związaną z HIV oraz w terapiach przeciwwirusowych. Ponadto ekspresja przez komórki C8166 określonych markerów powierzchniowych oraz ich wrażliwość na wnikanie i replikację wirusa HIV-1 sprawiają, że są one cenne w ocenie wpływu inhibitorów na replikację HIV i reakcje komórkowe w różnych warunkach, w tym w pożywkach bezsurowicowych, które, jak wykazano, zmieniają poziomy ekspresji niektórych receptorów i z czasem zmniejszają zakaźność wirusa HIV.
Zdolność adaptacyjna tej linii komórkowej oraz jej wrażliwość na HIV i HTLV-1 stanowią dynamiczny system do badań w dziedzinie wirusologii i immunologii, w szczególności w celu zrozumienia latencji wirusowej, mechanizmów replikacji oraz potencjalnych interwencji terapeutycznych ukierunkowanych na infekcje wirusowe w komórkach T.
- Chusteczka
- Krew pępowinowa
- Synonimy
- C8166-CD4
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zawieszenie
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 2
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobne do limfoblastów
- Typ komórki
- Limfoblastoid
04Identyfikatory
- Źródło
- C8166 (numer katalogowy Cytion 305528)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1099
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Hodowla komórek w subkulturze
- Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 2–4 × 10⁵ komórek/ml
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Darczyńca
- Wiek dawcy
- Noworodek
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
