Siirry sisältöön
C8166
Kudos
Napanuoraveri
Synonyymit
C8166-CD4

Asiakirjat

C8166

Cell line · Tuotenumero 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

C8166-solulinja on ihmisen T-soluleukemiaviruksen tyypin 1 (HTLV-1) avulla transformoitu T-solulinja, jota käytetään laajalti retrovirusinfektioiden, erityisesti HIV:n ja HTLV:n, tutkimuksessa. Alun perin C8166-solut on johdettu fuusioimalla napanuoraverestä peräisin olevia lymfosyyttejä leukemia- ja lymfoomapotilaiden T-soluilla, ja ne säilyttävät HTLV-1-genomin ja ilmentävät virus-RNA:ta tuottamatta tarttuvia HTLV-1-partikkeleita. Tämä solulinja erottuu erityisesti suuresta alttiudestaan HIV-1-infektiolle, mikä ilmenee synkytiumien muodostumisena – suurina, moniytimisinä soluina, jotka syntyvät viruksen fuusioaktiviteetin seurauksena. Tämä tekee siitä luotettavan mallin HIV:n patogeneesin ja sytopaattisten vaikutusten tutkimiseen in vitro.

C8166-soluja on käytetty laajasti tutkimuksissa, joissa tarkastellaan virusgeenien toimintoja ja vuorovaikutuksia, kuten HIV-1-viruksen R-proteiinia (Vpr), joka voi indusoida G2/M-solusyklin pysähtymisen ja apoptoosin tartunnan saaneissa T-soluissa. Vpr:n tuomisen C8166-soluihin on osoitettu aktivoivan kaspaasiin liittyviä apoptoottisia reittejä, mikä viittaa sen potentiaaliin kohteena HIV:hen liittyvissä apoptoositutkimuksissa ja antiviraalisissa hoidoissa. Lisäksi C8166-solujen tiettyjen pintamarkkerien ilmentyminen sekä herkkyys HIV-1:n soluunpääsylle ja replikaatiolle tekevät niistä arvokkaita arvioitaessa estäjien vaikutuksia HIV:n replikaatioon ja soluvasteisiin erilaisissa olosuhteissa, mukaan lukien seerumittomat elatusaineet, joiden on osoitettu muuttavan tiettyjen reseptorien ilmentymistasoja ja vähentävän HIV:n tarttuvuutta ajan myötä.

Tämän solulinjan sopeutumiskyky ja herkkyys HIV:lle ja HTLV-1:lle tarjoavat dynaamisen järjestelmän virologian ja immunologian tutkimukselle, erityisesti viruslatenssin, replikaatiomekanismien ja T-soluissa esiintyviä virusinfektioita kohdentavien mahdollisten terapeuttisten interventioiden ymmärtämiseksi.

Kudos
Napanuoraveri
Synonyymit
  • C8166-CD4

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastien kaltaiset
Solutyyppi
Lymfoblastoidi

04Tunnisteet

Lähdeviite
C8166 (Cytionin tuotenumero 305528)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2–4 × 10⁵ solua/ml
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Vastasyntynyt
Etnisyys
Kaukasialainen