C8166
Cell line · Product number 305528
The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים C8166 הוא קו תאי T שעבר טרנספורמציה על ידי נגיף לוקמיה של תאי T אנושיים מסוג 1 (HTLV-1), והוא נמצא בשימוש נרחב במחקר על זיהומים רטרו-ויראליים, ובפרט HIV ו-HTLV. תאי C8166, שהופקו בתחילה על ידי מיזוג לימפוציטים מדם חבל הטבור עם תאי T מחולי לוקמיה-לימפומה, שומרים על הגנום של HTLV-1 ומבטאים RNA נגיפי מבלי לייצר חלקיקים מדבקים של HTLV-1. קו תאים זה בולט ברגישותו הגבוהה לזיהום ב-HIV-1, המתבטאת ביצירת סינציטיונים – תאים גדולים ורב-גרעיניים הנוצרים כתוצאה מפעילות מיזוג נגיפית – מה שהופך אותו למודל אמין למחקרים על פתוגנזה של HIV והשפעות ציטופתיות במבחנה.
תאי C8166 שימשו בהרחבה במחקרים שבחנו תפקודי גנים נגיפיים ואינטראקציות, כגון החלבון הנגיפי R (Vpr) של HIV-1, המסוגל לגרום לעצירת מחזור התא בשלב G2/M ולאפופטוזיס בתאי T נגועים. הוכח כי החדרת Vpr לתאי C8166 מפעילה מסלולי אפופטוזיס הקשורים לקספאז, מה שמצביע על הפוטנציאל שלו כמטרה במחקרים על אפופטוזיס הקשור ל-HIV ובטיפולים אנטי-ויראליים. בנוסף, הביטוי של סמנים ספציפיים על פני השטח של תאי C8166 ורגישותם לכניסה ולהתרבות של HIV-1 הופכים אותם לכלי חשוב להערכת ההשפעות של מעכבים על התרבות ה-HIV ועל התגובות התאיות בתנאים שונים, כולל מצע נטול סרום, אשר הוכח כמשנה את רמות הביטוי של קולטנים מסוימים ומפחית את יכולת ההדבקה של ה-HIV לאורך זמן.
יכולת ההסתגלות של קו תאים זה ורגישותו ל-HIV ול-HTLV-1 מספקות מערכת דינמית למחקר בווירולוגיה ובאימונולוגיה, במיוחד להבנת הרדמות נגיפית, מנגנוני שכפול והתערבויות טיפוליות פוטנציאליות המכוונות לזיהומים נגיפיים בתאי T.
- Tissue
- דם חבל הטבור
- Synonyms
- C8166-CD4
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- דמוי לימפוציט
- Cell type
- לימפוציטואידי
04Identifiers
- Citation
- C8166 (מספר קטלוג Cytion 305528)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1099
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Subculturing
- אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
- Seeding density
- 2–4 × 10⁵ תאים/מ"ל
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- תינוק בן יומו
- Ethnicity
- קווקזי
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
