Skip to content
C8166
Tissue
דם חבל הטבור
Synonyms
C8166-CD4

Documents

C8166

Cell line · Product number 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

US$540.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים C8166 הוא קו תאי T שעבר טרנספורמציה על ידי נגיף לוקמיה של תאי T אנושיים מסוג 1 (HTLV-1), והוא נמצא בשימוש נרחב במחקר על זיהומים רטרו-ויראליים, ובפרט HIV ו-HTLV. תאי C8166, שהופקו בתחילה על ידי מיזוג לימפוציטים מדם חבל הטבור עם תאי T מחולי לוקמיה-לימפומה, שומרים על הגנום של HTLV-1 ומבטאים RNA נגיפי מבלי לייצר חלקיקים מדבקים של HTLV-1. קו תאים זה בולט ברגישותו הגבוהה לזיהום ב-HIV-1, המתבטאת ביצירת סינציטיונים – תאים גדולים ורב-גרעיניים הנוצרים כתוצאה מפעילות מיזוג נגיפית – מה שהופך אותו למודל אמין למחקרים על פתוגנזה של HIV והשפעות ציטופתיות במבחנה.

תאי C8166 שימשו בהרחבה במחקרים שבחנו תפקודי גנים נגיפיים ואינטראקציות, כגון החלבון הנגיפי R (Vpr) של HIV-1, המסוגל לגרום לעצירת מחזור התא בשלב G2/M ולאפופטוזיס בתאי T נגועים. הוכח כי החדרת Vpr לתאי C8166 מפעילה מסלולי אפופטוזיס הקשורים לקספאז, מה שמצביע על הפוטנציאל שלו כמטרה במחקרים על אפופטוזיס הקשור ל-HIV ובטיפולים אנטי-ויראליים. בנוסף, הביטוי של סמנים ספציפיים על פני השטח של תאי C8166 ורגישותם לכניסה ולהתרבות של HIV-1 הופכים אותם לכלי חשוב להערכת ההשפעות של מעכבים על התרבות ה-HIV ועל התגובות התאיות בתנאים שונים, כולל מצע נטול סרום, אשר הוכח כמשנה את רמות הביטוי של קולטנים מסוימים ומפחית את יכולת ההדבקה של ה-HIV לאורך זמן.

יכולת ההסתגלות של קו תאים זה ורגישותו ל-HIV ול-HTLV-1 מספקות מערכת דינמית למחקר בווירולוגיה ובאימונולוגיה, במיוחד להבנת הרדמות נגיפית, מנגנוני שכפול והתערבויות טיפוליות פוטנציאליות המכוונות לזיהומים נגיפיים בתאי T.

Tissue
דם חבל הטבור
Synonyms
  • C8166-CD4

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
דמוי לימפוציט
Cell type
לימפוציטואידי

04Identifiers

Citation
C8166 (מספר קטלוג Cytion 305528)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Subculturing
אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
Seeding density
2–4 × 10⁵ תאים/מ"ל
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
תינוק בן יומו
Ethnicity
קווקזי