Tartalomra ugrás
C8166
Szövet
Köldökzsinórvér
Szinonimák
C8166-CD4

Dokumentumok

C8166

Cell line · Termékszám 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A C8166 sejtvonal az 1-es típusú humán T-sejtes leukémia-vírus (HTLV-1) által transzformált T-sejtvonal, amelyet széles körben alkalmaznak a retrovirális fertőzésekkel, különösen a HIV-vel és a HTLV-vel kapcsolatos kutatásokban. A C8166 sejteket eredetileg köldökzsinórvérből származó limfociták és leukémia-limfóma-betegekből származó T-sejtek fúziójával állították elő; ezek a sejtek megőrzik a HTLV-1 genomot és expresszálják a vírus RNS-ét anélkül, hogy fertőző HTLV-1 részecskéket termelnének. Ez a sejtvonal kiemelkedő mértékű fogékonyságával tűnik ki a HIV-1-fertőzésre, amit a szincíciumok kialakulása bizonyít – ezek a vírusos fúziós aktivitás eredményeként létrejövő nagy, többmagvú sejtek –, így megbízható modellként szolgál a HIV patogenezisének és citopátiás hatásainak in vitro vizsgálatához.

A C8166 sejteket széles körben használták olyan vírusgén-funkciók és kölcsönhatások vizsgálatában, mint például a HIV-1 R vírusfehérje (Vpr), amely G2/M sejtciklus-leállást és apoptózist indukálhat a fertőzött T-sejtekben. Kimutatták, hogy a Vpr C8166-sejtekbe való bejuttatása aktiválja a kaszpázhoz kapcsolódó apoptotikus útvonalakat, ami arra utal, hogy potenciális célpontként szolgálhat a HIV-hez kapcsolódó apoptózis-kutatásokban és antivirális terápiákban. Ezen felül a C8166 specifikus felszíni markerek expressziója, valamint az HIV-1 behatolására és replikációjára való érzékenysége értékessé teszi a gátlók HIV-replikációra és sejtválaszokra gyakorolt hatásainak értékeléséhez különböző körülmények között, beleértve a szérummentes táptalajt is, amelyről kimutatták, hogy idővel megváltoztatja bizonyos receptorok expressziós szintjét és csökkenti az HIV fertőzőképességét.

Ez a sejtvonal alkalmazkodóképessége és az HIV-vel, valamint a HTLV-1-vel szembeni érzékenysége révén dinamikus rendszert biztosít a virológiai és immunológiai kutatások számára, különösen a víruslatencia, a replikációs mechanizmusok, valamint a T-sejtekben előforduló vírusfertőzéseket célzó potenciális terápiás beavatkozások megértése szempontjából.

Szövet
Köldökzsinórvér
Szinonimák
  • C8166-CD4

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Limfoblaszt-szerű
Sejttípus
Lymphoblastoid

04Azonosítók

Hivatkozás
C8166 (Cytion katalógusszám: 305528)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Átültetés
Gyűjtse össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan mossa át a megtapadt sejteket kalciumot és magnéziumot nem tartalmazó PBS-szel (T25 lombik esetén 3-5 ml-t, T75 lombik esetén 5-10 ml-t használjon). Vigyen fel Accutase-t (1-2 ml-t T25 lombikokhoz, 2,5 ml-t T75 lombikokhoz), biztosítva a sejtréteg teljes lefedettségét. Hagyjuk a sejteket 10 percig szobahőmérsékleten inkubálni. Az inkubációt követően egyesítsük és centrifugáljuk a szuszpenziót és az adhezív sejteket. A centrifugálás után óvatosan reszuszpendáljuk a sejtpelletet, és a sejtszuszpenziót helyezzük át friss tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba.
Ültetési sűrűség
2–4 × 10⁵ sejt/ml
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
Újszülött
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi