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C8166
ティッシュ
臍帯血
同義語
C8166-CD4

C8166

Cell line · 製品番号 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

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01概要

説明

C8166細胞株は、ヒトT細胞白血病ウイルス1型(HTLV-1)によって形質転換されたT細胞株であり、レトロウイルス感染症、特にHIVおよびHTLVに関する研究で広く利用されている。 当初、臍帯血リンパ球と白血病・リンパ腫患者のT細胞を融合させて樹立されたC8166細胞は、HTLV-1ゲノムを保持し、感染性のあるHTLV-1粒子を産生することなくウイルスRNAを発現している。 この細胞株は、HIV-1 感染に対する感受性が高いことで知られており、これは、ウイルスの融合活性によって生じる大きな多核細胞である合胞体の形成によって実証されており、in vitro における HIV の病原性および細胞病変効果の研究のための堅牢なモデルとなっています。

C8166 細胞は、感染した T 細胞において G2/M 期細胞周期停止およびアポトーシスを誘導する HIV-1 ウイルスタンパク質 R (Vpr) など、ウイルスの遺伝子機能や相互作用を調べる研究で広く使用されています。 C8166細胞へのVprの導入は、カスパーゼ関連のアポトーシス経路を活性化することが示されており、HIV関連のアポトーシス研究や抗ウイルス療法における標的としての可能性を示唆しています。 さらに、C8166細胞は特定の表面マーカーを発現しており、HIV-1の侵入および複製に対して感受性が高いため、さまざまな条件下(特定の受容体の発現レベルを変化させ、時間の経過とともにHIVの感染力を低下させることが示されている無血清培地を含む)における、HIV複製および細胞応答に対する阻害剤の効果を評価する上で有用です。

この細胞株の適応性と、HIVおよびHTLV-1に対する感受性は、ウイルス学および免疫学の研究、特にウイルスの潜伏状態、複製メカニズム、およびT細胞におけるウイルス感染を標的とした潜在的な治療的介入の理解に向けた、動的な研究システムを提供する。

ティッシュ
臍帯血
同義語
  • C8166-CD4

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
サスペンション
バイオセーフティレベル
2

03特徴

形態学
リンパ芽球様
細胞の種類
リンパ芽球様体

04識別子

引用
C8166(Cytionカタログ番号 305528)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1099

05取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
継代培養
浮遊細胞を15 mlチューブに集め、カルシウムとマグネシウムを欠いたPBSで付着細胞を穏やかに洗浄する(T25フラスコでは3~5 ml、T75フラスコでは5~10 mlを使用)。アキュターゼ(T25フラスコでは1-2 ml、T75フラスコでは2.5 ml)を、細胞層を完全に覆うように塗布する。細胞を室温で10分間インキュベートする。インキュベーション後、懸濁液と接着細胞の両方を合わせて遠心する。遠心後、細胞ペレットを注意深く懸濁し、細胞懸濁液を新しい培地の入った新しいフラスコに移す。
播種密度
2~4 × 10⁵ 細胞/mL
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
新生児
民族
白人