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C8166
Tecido
Sangue do cordão umbilical
Sinónimos
C8166-CD4

Documentos

C8166

Cell line · Número do produto 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular C8166 é uma linha de células T transformada pelo vírus da leucemia de células T humanas tipo 1 (HTLV-1) e é amplamente utilizada na investigação sobre infeções retrovirais, nomeadamente o VIH e o HTLV. Inicialmente obtidas através da fusão de linfócitos do sangue do cordão umbilical com células T de doentes com leucemia-linfoma, as células C8166 mantêm o genoma do HTLV-1 e expressam ARN viral sem produzirem partículas infecciosas do HTLV-1. Esta linha celular destaca-se pela sua elevada suscetibilidade à infeção pelo VIH-1, o que se manifesta pela formação de sincícios — células grandes e multinucleadas resultantes da atividade de fusão viral —, tornando-a um modelo robusto para estudos sobre a patogénese do VIH e os efeitos citopáticos in vitro.

As células C8166 têm sido amplamente utilizadas em estudos que analisam as funções e interações dos genes virais, tais como a proteína viral R (Vpr) do VIH-1, que pode induzir a paragem do ciclo celular na fase G2/M e a apoptose em células T infetadas. Demonstrou-se que a introdução da Vpr nas células C8166 ativa vias apoptóticas relacionadas com as caspases, o que sugere o seu potencial como alvo em estudos sobre a apoptose relacionada com o VIH e em terapias antivirais. Além disso, a expressão de marcadores de superfície específicos pelas células C8166 e a sua sensibilidade à entrada e replicação do VIH-1 tornam-nas valiosas para avaliar os efeitos dos inibidores na replicação do VIH e nas respostas celulares em diferentes condições, incluindo meios sem soro, que demonstraram alterar os níveis de expressão de certos recetores e diminuir a infecciosidade do VIH ao longo do tempo.

A adaptabilidade e a sensibilidade desta linha celular ao VIH e ao HTLV-1 proporcionam um sistema dinâmico para a investigação em virologia e imunologia, particularmente para a compreensão da latência viral, dos mecanismos de replicação e de potenciais intervenções terapêuticas direcionadas para infeções virais nas células T.

Tecido
Sangue do cordão umbilical
Sinónimos
  • C8166-CD4

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
Tipo linfoblasto
Tipo de célula
Linfoblastoide

04Identificadores

Referência
C8166 (número de catálogo da Cytion 305528)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
Densidade de sementeira
2-4 × 10⁵ células/mL
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
Recém-nascido
Etnia
Caucasiano