Gå til innholdet
C8166
Vev
Navlestrengsblod
Synonymer
C8166-CD4

Dokumenter

C8166

Cell line · Produktnummer 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

C8166-cellelinjen er en T-cellelinje som er transformert av humant T-celle-leukemivirus type 1 (HTLV-1) og brukes i stor utstrekning i forskning på retrovirale infeksjoner, særlig HIV og HTLV. C8166-cellene ble opprinnelig fremstilt ved å fusjonere lymfocytter fra navlestrengsblod med T-celler fra pasienter med leukemi og lymfom. De beholder HTLV-1-genomet og uttrykker viralt RNA uten å produsere smittsomme HTLV-1-partikler. Denne cellelinjen er kjent for sin høye mottakelighet for HIV-1-infeksjon, noe som demonstreres ved dannelse av syncytier – store, flerkjernede celler som oppstår som følge av viral fusjonsaktivitet – noe som gjør den til en robust modell for studier av HIV-patogenese og cytopatiske effekter in vitro.

C8166-celler har blitt brukt i stor utstrekning i studier som undersøker virale genfunksjoner og interaksjoner, for eksempel HIV-1-virusproteinet R (Vpr), som kan indusere G2/M-cellesyklusstans og apoptose i infiserte T-celler. Det har vist seg at innføring av Vpr i C8166-celler aktiverer kaspaserelaterte apoptotiske signalveier, noe som tyder på dets potensial som mål i HIV-relaterte apoptosestudier og antivirale terapier. I tillegg gjør C8166-cellelinjens uttrykk av spesifikke overflatemarkører og følsomhet for HIV-1-inntrengning og -replikasjon den verdifull for å evaluere effekten av hemmere på HIV-replikasjon og cellulære responser under ulike betingelser, inkludert serumfrie medier, som har vist seg å endre uttrykksnivåene til visse reseptorer og redusere HIV-infektiviteten over tid.

Denne cellelinjens tilpasningsevne og følsomhet overfor HIV og HTLV-1 gir et dynamisk system for forskning innen virologi og immunologi, særlig for å forstå viral latens, replikasjonsmekanismer og potensielle terapeutiske tiltak rettet mot virusinfeksjoner i T-celler.

Vev
Navlestrengsblod
Synonymer
  • C8166-CD4

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblastlignende
Celletype
Lymfoblastoid

04Identifikatorer

Kildehenvisning
C8166 (Cytion-katalognummer 305528)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Samle suspensjonscellene i et 15 ml rør, og vask de adherente cellene forsiktig med PBS uten kalsium og magnesium (bruk 3-5 ml for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml for T25-kolber, 2,5 ml for T75-kolber) og sørg for full dekning av cellelaget. La cellene inkubere i romtemperatur i 10 minutter. Etter inkubasjon kombineres og sentrifugeres både suspensjonen og de adherente cellene. Etter sentrifugering resuspenderes cellepelleten forsiktig, og cellesuspensjonen overføres til nye kolber som inneholder nytt medium.
Såtetthet
2–4 × 10⁵ celler/ml
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
Nyfødt
Etnisitet
Kaukasisk