Přejít na obsah
C8166
Tkáň
Krev z pupečníkové šňůry
Synonyma
C8166-CD4

Dokumenty

C8166

Cell line · Číslo výrobku 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie C8166 je linie T-buněk transformovaná virem lidské T-buněčné leukémie typu 1 (HTLV-1) a je široce využívána ve výzkumu retrovirových infekcí, zejména HIV a HTLV. Buňky C8166, původně získané fúzí lymfocytů z pupečníkové krve s T-buňkami od pacientů s leukémií a lymfomem, si zachovávají genom HTLV-1 a exprimují virovou RNA, aniž by produkovaly infekční částice HTLV-1. Tato buněčná linie se vyznačuje vysokou náchylností k infekci HIV-1, což se projevuje tvorbou syncytií – velkých, vícejaderných buněk vznikajících v důsledku virové fúzní aktivity, což z ní činí spolehlivý model pro studium patogeneze HIV a cytopatických účinků in vitro.

Buňky C8166 byly hojně využívány ve studiích zkoumajících funkce a interakce virových genů, jako je například virový protein R (Vpr) viru HIV-1, který může v infikovaných T-buňkách vyvolat zastavení buněčného cyklu ve fázi G2/M a apoptózu. Bylo prokázáno, že zavedení Vpr do buněk C8166 aktivuje apoptotické signální dráhy spojené s kaspázami, což naznačuje jeho potenciál jako cíle ve studiích apoptózy související s HIV a v antivirových terapiích. Kromě toho je buněčná linie C8166 díky expresi specifických povrchových markerů a citlivosti na vstup a replikaci viru HIV-1 cenná pro hodnocení účinků inhibitorů na replikaci HIV a buněčné reakce za různých podmínek, včetně bezsérových médií, u nichž bylo prokázáno, že v průběhu času mění úrovně exprese určitých receptorů a snižují infekčnost viru HIV.

Přizpůsobivost této buněčné linie a její citlivost na HIV a HTLV-1 poskytují dynamický systém pro výzkum ve virologii a imunologii, zejména pro porozumění virové latenci, mechanismům replikace a potenciálním terapeutickým zásahům zaměřeným na virové infekce v T-buňkách.

Tkáň
Krev z pupečníkové šňůry
Synonyma
  • C8166-CD4

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblastům podobné
Typ buňky
Lymfoblastoidní

04Identifikátory

Citace
C8166 (katalogové číslo Cytion 305528)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁵ buněk/ml
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
Novorozenci
Etnická příslušnost
Kavkazský