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C8166
Tissue
Sang du cordon ombilical
Synonyms
C8166-CD4

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C8166

Cell line · Product number 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

US$540.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire C8166 est une lignée de cellules T transformées par le virus de la leucémie à cellules T humaines de type 1 (HTLV-1) ; elle est largement utilisée dans la recherche sur les infections rétrovirales, en particulier le VIH et l’HTLV. Initialement obtenues par fusion de lymphocytes du sang du cordon ombilical avec des cellules T provenant de patients atteints de leucémie ou de lymphome, les cellules C8166 conservent le génome de l’HTLV-1 et expriment l’ARN viral sans produire de particules infectieuses de l’HTLV-1. Cette lignée cellulaire se distingue par sa forte sensibilité à l’infection par le VIH-1, comme en témoigne la formation de syncytiums — de grandes cellules multinucléées résultant de l’activité de fusion virale —, ce qui en fait un modèle robuste pour les études sur la pathogenèse du VIH et les effets cytopathiques in vitro.

Les cellules C8166 ont été largement utilisées dans des études portant sur les fonctions et les interactions des gènes viraux, comme la protéine R (Vpr) du VIH-1, qui peut induire un arrêt du cycle cellulaire en phase G2/M et l’apoptose dans les cellules T infectées. Il a été démontré que l’introduction de la protéine Vpr dans les cellules C8166 active les voies apoptotiques liées aux caspases, ce qui souligne son potentiel en tant que cible dans les études sur l’apoptose liée au VIH et les thérapies antivirales. De plus, l’expression par les cellules C8166 de marqueurs de surface spécifiques et leur sensibilité à l’entrée et à la réplication du VIH-1 en font un outil précieux pour évaluer les effets des inhibiteurs sur la réplication du VIH et les réponses cellulaires dans différentes conditions, y compris dans des milieux sans sérum dont il a été démontré qu’ils modifient les niveaux d’expression de certains récepteurs et diminuent l’infectiosité du VIH au fil du temps.

L’adaptabilité de cette lignée cellulaire et sa sensibilité au VIH et au HTLV-1 constituent un système dynamique pour la recherche en virologie et en immunologie, en particulier pour la compréhension de la latence virale, des mécanismes de réplication et des interventions thérapeutiques potentielles ciblant les infections virales dans les cellules T.

Tissue
Sang du cordon ombilical
Synonyms
  • C8166-CD4

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De type lymphoblaste
Cell type
Lymphoblastoïde

04Identifiers

Citation
C8166 (numéro de catalogue Cytion 305528)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Subculturing
Recueillez les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et lavez délicatement les cellules adhérentes avec du PBS sans calcium ni magnésium (utilisez 3 à 5 ml pour les flacons T25 et 5 à 10 ml pour les flacons T75). Appliquez de l’Accutase (1 à 2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à bien recouvrir toute la couche cellulaire. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l’incubation, combinez la suspension et les cellules adhérentes, puis centrifugez le tout. Après la centrifugation, remettez soigneusement le culot cellulaire en suspension et transférez la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Seeding density
2 à 4 × 10⁵ cellules/mL
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Donor age
Nouveau-né
Ethnicity
caucasien