C8166
Cell line · Product number 305528
The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire C8166 est une lignée de cellules T transformées par le virus de la leucémie à cellules T humaines de type 1 (HTLV-1) ; elle est largement utilisée dans la recherche sur les infections rétrovirales, en particulier le VIH et l’HTLV. Initialement obtenues par fusion de lymphocytes du sang du cordon ombilical avec des cellules T provenant de patients atteints de leucémie ou de lymphome, les cellules C8166 conservent le génome de l’HTLV-1 et expriment l’ARN viral sans produire de particules infectieuses de l’HTLV-1. Cette lignée cellulaire se distingue par sa forte sensibilité à l’infection par le VIH-1, comme en témoigne la formation de syncytiums — de grandes cellules multinucléées résultant de l’activité de fusion virale —, ce qui en fait un modèle robuste pour les études sur la pathogenèse du VIH et les effets cytopathiques in vitro.
Les cellules C8166 ont été largement utilisées dans des études portant sur les fonctions et les interactions des gènes viraux, comme la protéine R (Vpr) du VIH-1, qui peut induire un arrêt du cycle cellulaire en phase G2/M et l’apoptose dans les cellules T infectées. Il a été démontré que l’introduction de la protéine Vpr dans les cellules C8166 active les voies apoptotiques liées aux caspases, ce qui souligne son potentiel en tant que cible dans les études sur l’apoptose liée au VIH et les thérapies antivirales. De plus, l’expression par les cellules C8166 de marqueurs de surface spécifiques et leur sensibilité à l’entrée et à la réplication du VIH-1 en font un outil précieux pour évaluer les effets des inhibiteurs sur la réplication du VIH et les réponses cellulaires dans différentes conditions, y compris dans des milieux sans sérum dont il a été démontré qu’ils modifient les niveaux d’expression de certains récepteurs et diminuent l’infectiosité du VIH au fil du temps.
L’adaptabilité de cette lignée cellulaire et sa sensibilité au VIH et au HTLV-1 constituent un système dynamique pour la recherche en virologie et en immunologie, en particulier pour la compréhension de la latence virale, des mécanismes de réplication et des interventions thérapeutiques potentielles ciblant les infections virales dans les cellules T.
- Tissue
- Sang du cordon ombilical
- Synonyms
- C8166-CD4
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De type lymphoblaste
- Cell type
- Lymphoblastoïde
04Identifiers
- Citation
- C8166 (numéro de catalogue Cytion 305528)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1099
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Subculturing
- Recueillez les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et lavez délicatement les cellules adhérentes avec du PBS sans calcium ni magnésium (utilisez 3 à 5 ml pour les flacons T25 et 5 à 10 ml pour les flacons T75). Appliquez de l’Accutase (1 à 2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à bien recouvrir toute la couche cellulaire. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l’incubation, combinez la suspension et les cellules adhérentes, puis centrifugez le tout. Après la centrifugation, remettez soigneusement le culot cellulaire en suspension et transférez la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
- Seeding density
- 2 à 4 × 10⁵ cellules/mL
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donor
- Donor age
- Nouveau-né
- Ethnicity
- caucasien
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
