Skip to content
C8166
Tissue
เลือดจากสายสะดือ
Synonyms
C8166-CD4

Documents

C8166

Cell line · Product number 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ C8166 เป็นสายเซลล์ T ที่ถูกแปลงโดยไวรัสโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิด T ของมนุษย์ ชนิดที่ 1 (HTLV-1) และถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยเกี่ยวกับการติดเชื้อเรโทรไวรัส โดยเฉพาะอย่างยิ่ง HIV และ HTLV เซลล์ C8166 ซึ่งถูกสร้างขึ้นครั้งแรกโดยการรวมเซลล์ลิมโฟไซต์จากเลือดสายสะดือกับเซลล์ T จากผู้ป่วยโรคลูคีเมีย-ลิมโฟมา ยังคงเก็บรักษาจีโนม HTLV-1 และแสดง RNA ของไวรัสโดยไม่ผลิตอนุภาค HTLV-1 ที่สามารถติดเชื้อได้ สายเซลล์นี้โดดเด่นด้วยความไวต่อการติดเชื้อ HIV-1 ที่สูง ซึ่งแสดงให้เห็นได้จากการก่อตัวของซินซิเทียม—เซลล์ขนาดใหญ่ที่มีนิวเคลียสหลายตัว ซึ่งเกิดจากกิจกรรมฟิวชันของไวรัส ทำให้มันเป็นแบบจำลองที่เชื่อถือได้สำหรับการศึกษาเกี่ยวกับกลไกการเกิดโรคของ HIV และผลกระทบต่อเซลล์ในหลอดทดลอง

เซลล์ C8166 ได้ถูกใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาเกี่ยวกับหน้าที่และปฏิสัมพันธ์ของยีนไวรัส เช่น โปรตีน R (Vpr) ของไวรัส HIV-1 ซึ่งสามารถก่อให้เกิดการหยุดชะงักของวงจรเซลล์ที่ระยะ G2/M และกระบวนการอะพอพโทซิสในเซลล์ T ที่ติดเชื้อ การนำ Vpr เข้าสู่เซลล์ C8166 ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถกระตุ้นเส้นทางอะพอพโทซิสที่เกี่ยวข้องกับแคสเพส ซึ่งชี้ให้เห็นถึงศักยภาพของมันในฐานะเป้าหมายในการศึกษาอะพอพโทซิสที่เกี่ยวข้องกับ HIV และการรักษาต้านไวรัส นอกจากนี้ การแสดงออกของมาร์กเกอร์พื้นผิวเฉพาะและความไวต่อการเข้าสู่เซลล์และการจำลองตัวของ HIV-1 ของเซลล์ C8166 ทำให้เซลล์นี้มีความสำคัญในการประเมินผลของสารยับยั้งต่อการจำลองตัวของ HIV และการตอบสนองของเซลล์ภายใต้เงื่อนไขต่าง ๆ รวมถึงสื่อเพาะเลี้ยงที่ไม่มีซีรั่ม ซึ่งได้แสดงให้เห็นว่าสามารถเปลี่ยนแปลงระดับการแสดงออกของตัวรับบางชนิดและลดความสามารถในการติดเชื้อของ HIV ตามเวลา

ความสามารถในการปรับตัวและความไวต่อ HIV และ HTLV-1 ของสายเซลล์นี้ ให้ระบบวิจัยที่พลวัตสำหรับสาขาไวรัสวิทยาและภูมิคุ้มกันวิทยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทำความเข้าใจภาวะแฝงของไวรัส กลไกการจำลองตัว และวิธีการรักษาที่อาจใช้เพื่อจัดการกับการติดเชื้อไวรัสในเซลล์ T

Tissue
เลือดจากสายสะดือ
Synonyms
  • C8166-CD4

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายลิมโฟบลาสต์
Cell type
ลิมโฟบลาสโตอยด์

04Identifiers

Citation
C8166 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305528)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Seeding density
2–4 × 10⁵ เซลล์/มิลลิลิตร
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
ทารกแรกเกิด
Ethnicity
คอเคเชียน