Preskoči na vsebino
C8166
Tkivo
Kri iz popkovine
Sinonimi
C8166-CD4

Dokumenti

C8166

Cell line · Številka izdelka 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija C8166 je linija T-celic, transformirana z virusom levkemije človeških T-celic tipa 1 (HTLV-1), in se pogosto uporablja v raziskavah retrovirusnih okužb, zlasti HIV in HTLV. Celice C8166, ki so bile prvotno pridobljene s fuzijo limfocitov iz popkovne krvi s T-celicami bolnikov z levkemijo in limfomom, ohranjajo genom HTLV-1 in izražajo virusno RNK, ne da bi proizvajale infekciozne delce HTLV-1. Ta celična linija se odlikuje po visoki dovzetnosti za okužbo z virusom HIV-1, kar se kaže v nastajanju sincij – velikih, večjedrnih celic, ki so posledica virusne fuzijske aktivnosti, zaradi česar je zanesljiv model za študije patogeneze virusa HIV in citopatskih učinkov in vitro.

Celice C8166 se obsežno uporabljajo v študijah, ki preučujejo funkcije in interakcije virusnih genov, kot je na primer virusni protein R (Vpr) virusa HIV-1, ki lahko v okuženih T-celicah povzroči zaustavitev celičnega cikla v fazi G2/M in apoptozo. Pokazalo se je, da uvedba Vpr v celice C8166 aktivira apoptične poti, povezane s kaspazami, kar nakazuje njegov potencial kot tarče v študijah apoptoze, povezane z virusom HIV, in protivirusnih terapijah. Poleg tega so izražanje specifičnih površinskih markerjev v celicah C8166 ter njihova občutljivost na vstop in replikacijo virusa HIV-1 dragoceni za ocenjevanje učinkov zaviralcev na replikacijo virusa HIV in celične odzive v različnih pogojih, vključno z gojišči brez seruma, za katera je bilo dokazano, da sčasoma spreminjajo ravni izražanja nekaterih receptorjev in zmanjšujejo infektivnost virusa HIV.

Prilagodljivost te celične linije in njena občutljivost na HIV in HTLV-1 zagotavljata dinamičen sistem za raziskave na področju virologije in imunologije, zlasti za razumevanje virusne latence, mehanizmov replikacije in potencialnih terapevtskih posegov, usmerjenih v virusne okužbe v T-celicah.

Tkivo
Kri iz popkovine
Sinonimi
  • C8166-CD4

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Limfoblastom podobni
Vrsta celice
Limfoblastoidni

04Identifikatorji

Navajanje vira
C8166 (kataloška številka Cytion 305528)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
V 15 ml epruveti zberite suspenzijske celice in jih nežno sperite s PBS brez kalcija in magnezija (uporabite 3-5 ml za bučke T25 in 5-10 ml za bučke T75). Uporabite Accutase (1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75), tako da popolnoma prekrijete plast celic. Počakajte, da se celice inkubirajo pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji združite in centrifugirajte suspenzijo in adherentne celice. Po centrifugiranju previdno ponovno suspendirajte celično peleto in celično suspenzijo prenesite v nove bučke s svežim gojiščem.
Gostota setve
2–4 × 10⁵ celic/ml
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
Novorojenček
Etnična pripadnost
Kavkaški