İçeriğe atla
C8166
Doku
Göbek kordonu kanı
Eş anlamlılar
C8166-CD4

C8166

Cell line · Ürün numarası 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

C8166 hücre hattı, İnsan T-Hücre Lösemi Virüsü tip 1 (HTLV-1) tarafından dönüştürülmüş bir T-hücre hattıdır ve retroviral enfeksiyonlar, özellikle de HIV ve HTLV üzerine yapılan araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Başlangıçta göbek kordonu kanı lenfositlerinin lösemi-lenfoma hastalarından alınan T hücreleriyle füzyon yoluyla elde edilen C8166 hücreleri, HTLV-1 genomunu muhafaza eder ve bulaşıcı HTLV-1 partikülleri üretmeden viral RNA'yı eksprese eder. Bu hücre hattı, HIV-1 enfeksiyonuna karşı yüksek duyarlılığıyla dikkat çeker; bu durum, viral füzyon aktivitesinin sonucu olarak ortaya çıkan büyük, çok çekirdekli hücreler olan sinsiti oluşumuyla kanıtlanır ve bu da onu, in vitro ortamda HIV patogenezi ve sitopatik etkiler üzerine yapılan çalışmalar için sağlam bir model haline getirir.

C8166 hücreleri, enfekte olmuş T hücrelerinde G2/M hücre döngüsü durmasını ve apoptozu indükleyebilen HIV-1 viral proteini R (Vpr) gibi viral gen fonksiyonlarını ve etkileşimlerini inceleyen çalışmalarda yaygın olarak kullanılmıştır. Vpr'nin C8166 hücrelerine eklenmesinin, kaspazla ilişkili apoptoz yolaklarını aktive ettiği gösterilmiştir; bu da, HIV ile ilişkili apoptoz çalışmaları ve antiviral tedavilerde bir hedef olarak potansiyelini ortaya koymaktadır. Ek olarak, C8166 hücrelerinin spesifik yüzey belirteçlerini ifade etmesi ve HIV-1’in hücreye girişi ile replikasyonuna karşı duyarlılığı, bu hücre hattını, inhibitörlerin HIV replikasyonu ve hücresel yanıtlar üzerindeki etkilerini değerlendirmek için değerli kılmaktadır; bu değerlendirmeler, belirli reseptörlerin ekspresyon düzeylerini değiştirdiği ve zamanla HIV bulaşıcılığını azalttığı gösterilen serum içermeyen besiyerleri de dahil olmak üzere farklı koşullar altında gerçekleştirilebilir.

Bu hücre hattının uyarlanabilirliği ve HIV ile HTLV-1’e karşı duyarlılığı, viroloji ve immünoloji alanındaki araştırmalar için, özellikle de viral latens, replikasyon mekanizmaları ve T hücrelerindeki viral enfeksiyonları hedef alan potansiyel terapötik müdahalelerin anlaşılması açısından dinamik bir sistem sunmaktadır.

Doku
Göbek kordonu kanı
Eş anlamlılar
  • C8166-CD4

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Lenfoblast benzeri
Hücre türü
Lenfoblastoid

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
C8166 (Cytion katalog numarası 305528)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücrelerini 15 ml'lik bir tüpte toplayın ve yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile nazikçe yıkayın (T25 şişeleri için 3-5 ml ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın). Accutase uygulayın (T25 şişeler için 1-2 ml, T75 şişeler için 2,5 ml) ve hücre tabakasının tamamen kaplandığından emin olun. Hücreleri 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakın. İnkübasyonun ardından, hem süspansiyonu hem de yapışık hücreleri birleştirin ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunu taze ortam içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2-4 × 10⁵ hücre/mL
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yenidoğan
Etnik köken
Kafkas