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C8166
Pañuelo de papel
Sangre del cordón umbilical
Sinónimos
C8166-CD4

Documentos

C8166

Cell line · Número de producto 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

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Personalización / Recomendaciones

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Recomendado (lote más fresco)
  • CoA
1

01Información general

Descripción

La línea celular C8166 es una línea de células T transformadas por el virus de la leucemia de células T humanas tipo 1 (HTLV-1) y se utiliza ampliamente en la investigación sobre infecciones retrovirales, en particular el VIH y el HTLV. Las células C8166, obtenidas inicialmente mediante la fusión de linfocitos de sangre del cordón umbilical con células T de pacientes con leucemia y linfoma, conservan el genoma del HTLV-1 y expresan ARN viral sin producir partículas infecciosas del HTLV-1. Esta línea celular destaca por su elevada susceptibilidad a la infección por el VIH-1, lo que se manifiesta mediante la formación de sincitios —células grandes y multinucleadas resultantes de la actividad de fusión viral—, lo que la convierte en un modelo sólido para estudios sobre la patogénesis del VIH y los efectos citopáticos in vitro.

Las células C8166 se han utilizado ampliamente en estudios que examinan las funciones e interacciones de los genes virales, como la proteína R (Vpr) del VIH-1, que puede inducir la detención del ciclo celular en fase G2/M y la apoptosis en las células T infectadas. Se ha demostrado que la introducción de Vpr en las células C8166 activa las vías apoptóticas relacionadas con las caspasas, lo que sugiere su potencial como diana en estudios sobre la apoptosis relacionada con el VIH y en terapias antivirales. Además, la expresión de marcadores de superficie específicos por parte de las células C8166 y su sensibilidad a la entrada y replicación del VIH-1 las hacen valiosas para evaluar los efectos de los inhibidores sobre la replicación del VIH y las respuestas celulares en diferentes condiciones, incluidos los medios sin suero, que se ha demostrado que alteran los niveles de expresión de ciertos receptores y disminuyen la infectividad del VIH con el tiempo.

La adaptabilidad y la sensibilidad de esta línea celular al VIH y al HTLV-1 proporcionan un sistema dinámico para la investigación en virología e inmunología, especialmente para comprender la latencia viral, los mecanismos de replicación y las posibles intervenciones terapéuticas dirigidas a las infecciones virales en las células T.

Pañuelo de papel
Sangre del cordón umbilical
Sinónimos
  • C8166-CD4

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
Linfoblasto
Tipo de célula
Linfoblastoide

04Identificadores

Referencia
C8166 (número de catálogo de Cytion 305528)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Subcultivo
Reunir las células en suspensión en un tubo de 15 ml y lavar suavemente las células adherentes con PBS sin calcio ni magnesio (utilizar 3-5 ml para matraces T25 y 5-10 ml para matraces T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para matraces T25, 2,5 ml para matraces T75) asegurando la cobertura completa de la capa celular. Dejar incubar las células a temperatura ambiente durante 10 minutos. Tras la incubación, combinar y centrifugar tanto la suspensión como las células adherentes. Tras la centrifugación, resuspender cuidadosamente el sedimento celular y transferir la suspensión celular a nuevos matraces que contengan medio fresco.
Densidad de siembra
2-4 × 10⁵ células/mL
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
Recién nacido
Origen étnico
Caucásico