Prejsť na obsah
C8166
Tkanivo
Krv z pupočníka
Synonymá
C8166-CD4

Dokumenty

C8166

Cell line · Číslo výrobku 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka C8166 je línie T-buniek transformovaná vírusom ľudskej T-buneckej leukémie typu 1 (HTLV-1) a je široko využívaná vo výskume retrovírusových infekcií, najmä HIV a HTLV. Bunky C8166, pôvodne získané fúziou lymfocytov z pupočníkovej krvi s T-bunkami od pacientov s leukémiou a lymfómom, si zachovávajú genóm HTLV-1 a exprimujú vírusovú RNA bez produkcie infekčných častíc HTLV-1. Táto bunková línia sa vyznačuje vysokou náchylnosťou k infekcii HIV-1, čo sa prejavuje tvorbou syncytií – veľkých, viacjadrových buniek vznikajúcich v dôsledku vírusovej fúznej aktivity, čo z nej robí spoľahlivý model pre štúdie patogenézy HIV a cytopatických účinkov in vitro.

Bunky C8166 sa vo veľkej miere používajú v štúdiách skúmajúcich funkcie a interakcie vírusových génov, ako je napríklad vírusový proteín R (Vpr) vírusu HIV-1, ktorý môže v infikovaných T-bunkách vyvolať zastavenie bunkového cyklu v fáze G2/M a apoptózu. Ukázalo sa, že zavedenie Vpr do buniek C8166 aktivuje apoptotické dráhy súvisiace s kaspázami, čo naznačuje jeho potenciál ako cieľa v štúdiách apoptózy súvisiacej s HIV a v antivírusových terapiách. Okrem toho expresia špecifických povrchových markerov buniek C8166 a ich citlivosť na vstup a replikáciu vírusu HIV-1 z nich robia cenný nástroj na hodnotenie účinkov inhibítorov na replikáciu HIV a bunkové reakcie za rôznych podmienok, vrátane bezsérumových médií, o ktorých sa preukázalo, že menia hladiny expresie určitých receptorov a časom znižujú infekčnosť HIV.

Prispôsobivosť tejto bunkovej línie a jej citlivosť na HIV a HTLV-1 poskytujú dynamický systém pre výskum vo virológii a imunológii, najmä pre pochopenie vírusovej latencie, mechanizmov replikácie a potenciálnych terapeutických intervencií zameraných na vírusové infekcie v T-bunkách.

Tkanivo
Krv z pupočníka
Synonymá
  • C8166-CD4

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblastom podobné
Typ bunky
Lymfoblastoidné

04Identifikátory

Citácia
C8166 (katalógové číslo Cytion 305528)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1099

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁵ buniek/ml
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
Novorodenec
Etnická príslušnosť
Kaukazský