الانتقال إلى المحتوى
C8166
الأنسجة
دم الحبل السري
المرادفات
C8166-CD4

المستندات

C8166

Cell line · رقم المنتج 305528

The C8166 cell line is a T-cell line transformed by Human T-cell Leukemia Virus type 1 (HTLV-1) and is widely utilized in research on retroviral infection...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا C8166 هي سلسلة خلايا تائية تم تحويلها بواسطة فيروس سرطان الدم التائي البشري من النوع 1 (HTLV-1)، وتُستخدم على نطاق واسع في الأبحاث المتعلقة بالعدوى بالفيروسات القهقرية، ولا سيما فيروس نقص المناعة البشرية (HIV) وفيروس سرطان الدم التائي البشري (HTLV). وقد تم الحصول على خلايا C8166 في البداية عن طريق دمج الخلايا الليمفاوية المأخوذة من دم الحبل السري مع الخلايا التائية المأخوذة من مرضى اللوكيميا والليمفوما، وتحتفظ هذه الخلايا بجينوم فيروس HTLV-1 وتُعبّر عن الحمض النووي الريبي الفيروسي (RNA) دون إنتاج جسيمات معدية من فيروس HTLV-1. يتميز هذا الخط الخلوي بقابليته العالية للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية 1 (HIV-1)، وهو ما يتجلى في تكوين الخلايا المتحدّة (syncytia) — وهي خلايا كبيرة متعددة النوى ناتجة عن نشاط الاندماج الفيروسي — مما يجعله نموذجًا قويًّا للدراسات المتعلقة بتكوين مرض فيروس نقص المناعة البشرية والتأثيرات المسببة للخلل الخلوي في المختبر.

وقد استُخدمت خلايا C8166 على نطاق واسع في الدراسات التي تبحث وظائف الجينات الفيروسية وتفاعلاتها، مثل البروتين الفيروسي R (Vpr) لفيروس HIV-1 الذي يمكنه إحداث توقف دورة الخلية في مرحلة G2/M وموت الخلايا المبرمج في الخلايا التائية المصابة. وقد ثبت أن إدخال البروتين Vpr إلى خلايا C8166 ينشط مسارات موت الخلايا المبرمج المرتبطة بالكاسباز، مما يشير إلى إمكاناته كهدف في دراسات موت الخلايا المبرمج المرتبط بفيروس نقص المناعة البشرية والعلاجات المضادة للفيروسات. بالإضافة إلى ذلك، فإن تعبير خط الخلايا C8166 عن علامات سطحية محددة وحساسيته لدخول فيروس نقص المناعة البشرية من النوع 1 (HIV-1) وتكاثره يجعله قيّمًا لتقييم تأثيرات المثبطات على تكاثر الفيروس والاستجابات الخلوية في ظل ظروف مختلفة، بما في ذلك الوسائط الخالية من المصل التي ثبت أنها تغير مستويات التعبير عن مستقبلات معينة وتقلل من قدرة فيروس نقص المناعة البشرية على العدوى بمرور الوقت.

توفر قدرة هذا الخط الخلوي على التكيف وحساسيته لفيروس نقص المناعة البشرية (HIV) وفيروس التليف الكبدي البشري من النوع 1 (HTLV-1) نظامًا ديناميكيًا للبحوث في علم الفيروسات وعلم المناعة، لا سيما لفهم الكمون الفيروسي وآليات التكاثر والتدخلات العلاجية المحتملة التي تستهدف العدوى الفيروسية في الخلايا التائية.

الأنسجة
دم الحبل السري
المرادفات
  • C8166-CD4

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا اللمفاوية الشبيهة بالأرومة اللمفاوية
نوع الخلية
الخلايا اللمفاوية الأرومية اللمفاوية

04المعرّفات

المرجع
C8166 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305528)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1099

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
2-4 × 10⁵ خلية/مل
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
حديثي الولادة
الأصل العرقي
قوقازي