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RG2
Tissu
Cerveau
Maladie
Gliome malin de rat
Synonymes
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

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RG2

Cell line · Référence du produit 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire RG2 est dérivée d'un gliome induit chimiquement chez des rats Fischer 344. Générés par l'administration transplacentaire de N-éthyl-N-nitrosourée (ENU), les gliomes RG2 sont classés comme gliomes anaplasiques en raison de leur mode de croissance invasif, de leur indice mitotique élevé et de leur morphologie indifférenciée. Ces tumeurs sont remarquables pour leur létalité constante in vivo et leur capacité à se développer chez des hôtes syngéniques sans susciter de réponse immunitaire significative. Cette faible immunogénicité fait de RG2 un modèle idéal pour étudier les tumeurs de type glioblastome et tester des thérapies expérimentales dans des environnements immunocompétents.

Les cellules de gliome RG2 présentent des caractéristiques typiques des gliomes de haut grade, notamment une prolifération rapide, une capacité invasive et des altérations génomiques. Des études ont mis en évidence la perte de gènes suppresseurs de tumeurs tels que CDKN2A, ainsi que des voies dysrégulées impliquant les signaux PDGF, Ras et IGF. La lignée cellulaire se développe sous forme de cellules fusiformes indifférenciées in vitro et conserve son potentiel tumorigène lorsqu'elle est implantée au niveau intracrânien, où elle envahit de manière diffuse le tissu cérébral normal, imitant ainsi le comportement du glioblastome humain.

Cette lignée cellulaire a été largement utilisée dans la recherche préclinique pour évaluer l'efficacité de diverses approches thérapeutiques, notamment la chimiothérapie, la radiothérapie, la thérapie génique et l'immunothérapie. Les gliomes RG2 sont particulièrement utiles pour tester de nouvelles méthodes d'administration de médicaments, telles que l'administration par convection (CED), et pour étudier les mécanismes de rupture de la barrière hémato-encéphalique dans les gliomes. Sa ressemblance histopathologique et moléculaire avec les glioblastomes humains souligne son utilité en neuro-oncologie translationnelle.

Tissu
Cerveau
Maladie
Gliome malin de rat
Applications
culture cellulaire 3D, Neurosciences
Synonymes
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Classification

Organisme
Rat
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Gliales
Tumorigène
Oui, chez les rats CD Fischer

04Identifiants

Référence
RG2 (numéro de catalogue Cytion 300649)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
Fischer 344
Âge du donneur
20 jours après la gestation