
- Kude
- Aju
- Haigus
- Roti pahaloomuline glioom
- Sünonüümid
- RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2
Dokumendid
RG2
Cell line · Toote number 300649
The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...
Kohandamine / Soovitused
- RG2Cell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
RG2 rakuliin on saadud Fischer 344 rottide keemiliselt indutseeritud glioomist. N-etüül-N-nitrosokarbamiidi (ENU) transplacentaarsel manustamisel tekkinud RG2 glioomid liigitatakse anaplastilisteks glioomideks nende invasiivse kasvumustri, kõrge mitootilise indeksi ja diferentseerimata morfoloogia tõttu. Need kasvajad paistavad silma oma järjepideva letaalsuse tõttu in vivo ja võime tõttu kasvada süngeensetes peremeesorganismides ilma märkimisväärset immuunvastust esile kutsumata. Selline vähene immunogeensus muudab RG2 ideaalseks mudeliks glioblastoomi sarnaste kasvajate uurimiseks ja eksperimentaalsete ravimeetodite katsetamiseks immuunsüsteemis.
RG2 glioomirakkudel on kõrgekvaliteedilistele glioomidele iseloomulikud omadused, sealhulgas kiire proliferatsioon, invasiivne võime ja genoomi muutused. Uuringud on esile toonud kasvajasupressorgeenide, nagu CDKN2A, kadumise koos düsreguleeritud radadega, mis hõlmavad PDGF-, Ras- ja IGF-signalisatsiooni. Rakuliin kasvab in vitro diferentseerimata spindlikujulise rakuna, säilitades oma kasvupotentsiaali intrakraniaalse implanteerimise korral, kus neil esineb diferentseeritud invasiivsus normaalsesse ajukoes, jäljendades inimese glioblastoomi käitumist.
Seda rakuliini on laialdaselt kasutatud prekliinilistes uuringutes, et hinnata erinevate ravimeetodite, sealhulgas keemiaravi, kiiritusravi, geeniteraapia ja immunoteraapia tõhusust. RG2 glioomid on eriti väärtuslikud uute ravimite manustamismeetodite, näiteks konvektsioonivõimelise manustamise (CED), katsetamiseks ja vere-aju barjääri häirete mehhanismide uurimiseks glioomides. Selle histopatoloogiline ja molekulaarne sarnasus inimese glioblastoomidega rõhutab selle kasulikkust translatsioonilises neuroonkoloogias.
- Kude
- Aju
- Haigus
- Roti pahaloomuline glioom
- Rakendused
- 3D rakukultuur, neuroteadus
- Sünonüümid
- RG-2
- Rat Glioma-2
- D74
- D74-RG2
02Klassifikatsioon
- Organism
- Rott
- Sugu
- Määratlemata
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Glial
- Tuumorigeenne
- Jah, CD Fischer rottidel
04Tunnused
- Viide
- RG2 (Cytioni katalooginumber 300649)
- NCBI maksukood
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_3581
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Tõug / alamliik
- Fischer 344
- Doonori vanus
- 20 päeva pärast tiinuse algust
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah