Mine otse sisu juurde
RG2
Kude
Aju
Haigus
Roti pahaloomuline glioom
Sünonüümid
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Dokumendid

RG2

Cell line · Toote number 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

RG2 rakuliin on saadud Fischer 344 rottide keemiliselt indutseeritud glioomist. N-etüül-N-nitrosokarbamiidi (ENU) transplacentaarsel manustamisel tekkinud RG2 glioomid liigitatakse anaplastilisteks glioomideks nende invasiivse kasvumustri, kõrge mitootilise indeksi ja diferentseerimata morfoloogia tõttu. Need kasvajad paistavad silma oma järjepideva letaalsuse tõttu in vivo ja võime tõttu kasvada süngeensetes peremeesorganismides ilma märkimisväärset immuunvastust esile kutsumata. Selline vähene immunogeensus muudab RG2 ideaalseks mudeliks glioblastoomi sarnaste kasvajate uurimiseks ja eksperimentaalsete ravimeetodite katsetamiseks immuunsüsteemis.

RG2 glioomirakkudel on kõrgekvaliteedilistele glioomidele iseloomulikud omadused, sealhulgas kiire proliferatsioon, invasiivne võime ja genoomi muutused. Uuringud on esile toonud kasvajasupressorgeenide, nagu CDKN2A, kadumise koos düsreguleeritud radadega, mis hõlmavad PDGF-, Ras- ja IGF-signalisatsiooni. Rakuliin kasvab in vitro diferentseerimata spindlikujulise rakuna, säilitades oma kasvupotentsiaali intrakraniaalse implanteerimise korral, kus neil esineb diferentseeritud invasiivsus normaalsesse ajukoes, jäljendades inimese glioblastoomi käitumist.

Seda rakuliini on laialdaselt kasutatud prekliinilistes uuringutes, et hinnata erinevate ravimeetodite, sealhulgas keemiaravi, kiiritusravi, geeniteraapia ja immunoteraapia tõhusust. RG2 glioomid on eriti väärtuslikud uute ravimite manustamismeetodite, näiteks konvektsioonivõimelise manustamise (CED), katsetamiseks ja vere-aju barjääri häirete mehhanismide uurimiseks glioomides. Selle histopatoloogiline ja molekulaarne sarnasus inimese glioblastoomidega rõhutab selle kasulikkust translatsioonilises neuroonkoloogias.

Kude
Aju
Haigus
Roti pahaloomuline glioom
Rakendused
3D rakukultuur, neuroteadus
Sünonüümid
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Glial
Tuumorigeenne
Jah, CD Fischer rottidel

04Tunnused

Viide
RG2 (Cytioni katalooginumber 300649)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Fischer 344
Doonori vanus
20 päeva pärast tiinuse algust