Siirry sisältöön
RG2
Kudos
Aivot
Sairaus
Rotan pahanlaatuinen gliooma
Synonyymit
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Asiakirjat

RG2

Cell line · Tuotenumero 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

RG2-solulinja on peräisin Fischer 344 -rotilla kemiallisesti indusoidusta glioomasta. RG2-glioomat, jotka on tuotettu N-etyyli-N-nitrosourean (ENU) transplacentaalisella annostelulla, luokitellaan anaplastisiksi glioomeiksi niiden invasiivisen kasvutavan, korkean mitoosi-indeksin ja erilaistumattoman morfologian vuoksi. Nämä kasvaimet ovat merkittäviä, koska ne ovat jatkuvasti tappavia in vivo ja koska ne pystyvät kasvamaan syngeenisissä isännissä ilman merkittävää immuunivastetta. Tämä alhainen immunogeenisuus tekee RG2:sta ihanteellisen mallin glioblastooman kaltaisten kasvainten tutkimiseen ja kokeellisten hoitojen testaamiseen immunokompetentissa ympäristössä.

RG2-glioomisoluilla on korkea-asteisille glioomille tyypillisiä ominaisuuksia, kuten nopea lisääntyminen, invasiivinen kyky ja genomimuutokset. Tutkimuksissa on tuotu esiin kasvainsuppressorigeenien, kuten CDKN2A:n, häviäminen sekä PDGF-, Ras- ja IGF-signaalireittien säätelyhäiriöt. Solulinja kasvaa in vitro erilaistumattomina spindelinmuotoisina soluina, jotka säilyttävät tumorigeenisen potentiaalinsa, kun ne istutetaan kallonsisäisesti, jolloin niillä on diffuusi invaasio normaaliin aivokudokseen, mikä jäljittelee ihmisen glioblastooman käyttäytymistä.

Tätä solulinjaa on hyödynnetty laajasti prekliinisessä tutkimuksessa erilaisten terapeuttisten lähestymistapojen, kuten kemoterapian, sädehoidon, geeniterapian ja immunoterapian, tehokkuuden arvioimiseksi. RG2-glioomat ovat erityisen arvokkaita testattaessa uusia lääkkeenantomenetelmiä, kuten konvektiovoimaa hyödyntävää lääkkeenantoa (CED), ja tutkittaessa veri-aivoesteen rikkoutumisen mekanismeja glioomissa. Sen histopatologinen ja molekyylinen samankaltaisuus ihmisen glioblastoomien kanssa korostaa sen hyödyllisyyttä translationaalisessa neuro-onkologiassa.

Kudos
Aivot
Sairaus
Rotan pahanlaatuinen gliooma
Sovellukset
3D-soluviljely, Neurotiede
Synonyymit
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Glial
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, CD Fischer -rotilla

04Tunnisteet

Lähdeviite
RG2 (Cytionin luettelonumero 300649)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Fischer 344
Luovuttajan ikä
20 päivää raskauden jälkeen