Gå til innholdet
RG2
Vev
Hjerne
Sykdom
Malignt gliom hos rotter
Synonymer
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Dokumenter

RG2

Cell line · Produktnummer 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

RG2-cellelinjen er avledet fra et kjemisk indusert gliom hos Fischer 344-rotter. RG2-gliomer, som oppstår ved transplacental administrering av N-etyl-N-nitrosourea (ENU), klassifiseres som anaplastiske gliomer på grunn av deres invasive vekstmønster, høye mitoseindeks og udifferensierte morfologi. Disse svulstene er kjent for sin konsekvente dødelighet in vivo og sin evne til å vokse i syngene verter uten å fremkalle en signifikant immunrespons. Den lave immunogenisiteten gjør RG2 til en ideell modell for studier av glioblastomlignende svulster og testing av eksperimentelle behandlingsformer i immunkompetente miljøer.

RG2-gliomceller har egenskaper som er typiske for høygradsgliomer, blant annet rask proliferasjon, invasiv kapasitet og genomiske endringer. Studier har påvist tap av tumorsuppressorgener som CDKN2A, samt dysregulerte signalveier som involverer PDGF-, Ras- og IGF-signalering. Cellelinjen vokser som udifferensierte spindelformede celler in vitro, og opprettholder sitt tumorgenetiske potensial når de implanteres intrakranielt, der de viser diffus invasjon i normalt hjernevev, noe som etterligner oppførselen til humant glioblastom.

Denne cellelinjen har blitt brukt i utstrakt grad i preklinisk forskning for å evaluere effekten av ulike terapeutiske tilnærminger, inkludert kjemoterapi, strålebehandling, genterapi og immunterapi. RG2-gliomer er spesielt verdifulle for testing av nye metoder for tilførsel av legemidler, for eksempel konveksjonsforsterket tilførsel (CED), og for å undersøke mekanismer for forstyrrelse av blod-hjerne-barrieren i gliomer. Den histopatologiske og molekylære likheten med humane glioblastomer understreker gliomenes anvendelighet i translasjonsstudier innen nevroonkologi.

Vev
Hjerne
Sykdom
Malignt gliom hos rotter
Søknader
3D-cellekultur, Nevrovitenskap
Synonymer
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Sex
Uspesifisert
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Glial
Tumorinduserende
Ja, i CD Fischer-rotter

04Identifikatorer

Kildehenvisning
RG2 (Cytion-katalognummer 300649)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
Fischer 344
Donorens alder
20 dager etter svangerskapet