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RG2
Gewebe
Gehirn
Krankheit
Malignes Gliom der Ratte
Synonyme
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

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RG2

Cell line · Artikelnummer 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die RG2-Zelllinie stammt von einem chemisch induzierten Gliom bei Fischer-344-Ratten. RG2-Gliome werden durch transplazentare Verabreichung von N-Ethyl-N-Nitrosoharnstoff (ENU) erzeugt und aufgrund ihres invasiven Wachstumsmusters, ihres hohen Mitoseindex und ihrer undifferenzierten Morphologie als anaplastische Gliome eingestuft. Diese Tumore zeichnen sich durch ihre konsequente Letalität in vivo und ihre Fähigkeit aus, in syngenen Wirten zu wachsen, ohne eine signifikante Immunreaktion hervorzurufen. Diese geringe Immunogenität macht RG2 zu einem idealen Modell für die Untersuchung glioblastomähnlicher Tumoren und die Erprobung experimenteller Therapien in immunkompetenten Umgebungen.

RG2-Gliomzellen weisen typische Merkmale von hochgradigen Gliomen auf, darunter schnelle Proliferation, Invasionsfähigkeit und genomische Veränderungen. Studien haben den Verlust von Tumorsuppressorgenen wie CDKN2A sowie dysregulierte Signalwege, an denen PDGF-, Ras- und IGF-Signale beteiligt sind, aufgezeigt. Die Zelllinie wächst in vitro als undifferenzierte, spindelförmige Zellen und behält ihr tumorigenes Potenzial bei, wenn sie intrakraniell implantiert wird, wo sie eine diffuse Invasion in normales Hirngewebe zeigt und damit das Verhalten des menschlichen Glioblastoms nachahmt.

Diese Zelllinie wurde in der präklinischen Forschung ausgiebig genutzt, um die Wirksamkeit verschiedener therapeutischer Ansätze zu untersuchen, darunter Chemotherapie, Strahlentherapie, Gentherapie und Immuntherapie. RG2-Gliome sind besonders wertvoll für die Erprobung neuartiger Methoden zur Verabreichung von Medikamenten, wie z. B. der konvektionsunterstützten Verabreichung (CED), und für die Untersuchung der Mechanismen der Störung der Blut-Hirn-Schranke bei Gliomen. Ihre histopathologische und molekulare Ähnlichkeit mit menschlichen Glioblastomen unterstreicht ihren Nutzen für die translationale Neuroonkologie.

Gewebe
Gehirn
Krankheit
Malignes Gliom der Ratte
Anwendungen
3D-Zellkultur, Neurowissenschaften
Synonyme
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Glia
Tumorauslösend
Ja, bei CD-Fischer-Ratten

04Bezeichner

Quellenangabe
RG2 (Cytion Katalognummer 300649)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
Fischer 344
Alter des Spenders
20 Tage nach der Trächtigkeit