Tartalomra ugrás
RG2
Szövet
Agy
Betegség
Patkány rosszindulatú glióma
Szinonimák
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Dokumentumok

RG2

Cell line · Termékszám 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az RG2 sejtvonal Fischer 344 patkányokban kémiailag indukált gliomából származik. Az N-etil-N-nitrozourea (ENU) transzplacentáris beadásával létrehozott RG2 gliómákat invazív növekedési mintázatuk, magas mitotikus indexük és differenciálatlan morfológiájuk miatt az anaplasztikus gliómák közé sorolják. Ezek a tumorok in vivo következetes letalitása miatt figyelemre méltóak, valamint azért, mert képesek szinogén gazdaszervezetekben növekedni anélkül, hogy jelentős immunválaszt váltanának ki. Ez az alacsony immunogenitás teszi az RG2-t ideális modellé a glioblasztóma-szerű daganatok tanulmányozására és a kísérleti terápiák tesztelésére immunkompetens környezetben.

Az RG2 glióma sejtek a magas fokú gliómákra jellemző tulajdonságokkal rendelkeznek, beleértve a gyors proliferációt, az invazív képességet és a genomiális elváltozásokat. A vizsgálatok rámutattak a tumorszupresszor gének, például a CDKN2A elvesztésére, valamint a PDGF, Ras és IGF jelátviteli útvonalak diszregulációjára. A sejtvonal in vitro differenciálatlan, orsó alakú sejtekként növekszik, és megtartja tumorigén potenciálját, amikor intrakraniálisan beültetik, ahol diffúz inváziót mutatnak a normál agyszövetbe, ami utánozza a humán glioblasztóma viselkedését.

Ezt a sejtvonalat széles körben használták preklinikai kutatásokban a különböző terápiás megközelítések, köztük a kemoterápia, sugárterápia, génterápia és immunterápia hatékonyságának értékelésére. Az RG2 gliómák különösen értékesek az új gyógyszerbeviteli módszerek, például a konvekcióval támogatott gyógyszerbevitel (CED) tesztelésére, valamint a vér-agy gát megszakadásának mechanizmusainak vizsgálatára a gliómákban. A humán glioblasztómákhoz való szövettani és molekuláris hasonlósága aláhúzza hasznosságát a transzlációs neuroonkológiában.

Szövet
Agy
Betegség
Patkány rosszindulatú glióma
Alkalmazások
3D sejtkultúra, Idegtudomány
Szinonimák
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Glial
Daganatképző
Igen, CD Fischer patkányokban

04Azonosítók

Hivatkozás
RG2 (Cytion katalógusszám: 300649)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
Fischer 344
Az adományozó életkora
20 nappal a terhesség után