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RG2
Tissue
Cerveau
Disease
Gliome malin chez le rat
Synonyms
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

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RG2

Cell line · Product number 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire RG2 provient d’un gliome induit chimiquement chez des rats Fischer 344. Générés par l’administration transplacentaire de N-éthyl-N-nitrosourée (ENU), les gliomes RG2 sont classés parmi les gliomes anaplasiques en raison de leur mode de croissance invasif, de leur indice mitotique élevé et de leur morphologie indifférenciée. Ces tumeurs se distinguent par leur létalité constante in vivo et leur capacité à se développer chez des hôtes syngéniques sans déclencher de réponse immunitaire significative. Cette faible immunogénicité fait de la lignée RG2 un modèle idéal pour l’étude des tumeurs de type glioblastome et pour l’évaluation de thérapies expérimentales dans des contextes immunocompétents.

Les cellules de gliome RG2 présentent des caractéristiques typiques des gliomes de haut grade, notamment une prolifération rapide, une capacité invasive et des altérations génomiques. Des études ont mis en évidence la perte de gènes suppresseurs de tumeurs tels que CDKN2A, ainsi qu’une dérégulation des voies de signalisation impliquant le PDGF, Ras et l’IGF. La lignée cellulaire se développe in vitro sous forme de cellules indifférenciées de forme fusiforme, conservant son potentiel tumorigène lorsqu’elle est implantée de manière intracrânienne, où elle présente une invasion diffuse dans le tissu cérébral normal, imitant ainsi le comportement du glioblastome humain.

Cette lignée cellulaire a été largement utilisée dans la recherche préclinique pour évaluer l’efficacité de diverses approches thérapeutiques, notamment la chimiothérapie, la radiothérapie, la thérapie génique et l’immunothérapie. Les gliomes RG2 sont particulièrement utiles pour tester de nouvelles méthodes d’administration de médicaments, telles que l’administration par convection améliorée (CED), et pour étudier les mécanismes de rupture de la barrière hémato-encéphalique dans les gliomes. Sa ressemblance histopathologique et moléculaire avec les glioblastomes humains souligne son utilité en neuro-oncologie translationnelle.

Tissue
Cerveau
Disease
Gliome malin chez le rat
Applications
Culture cellulaire en 3D, neurosciences
Synonyms
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Classification

Organism
Rat
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Glial
Tumourigenic
Oui, chez les rats CD Fischer

04Identifiers

Citation
RG2 (numéro de catalogue Cytion 300649)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Breed / subspecies
Fischer 344
Donor age
20 jours de gestation