RG2

A linhagem celular RG2 é derivada de um glioma induzido quimicamente em ratos Fischer 344. Gerados por meio da administração transplacentária de N-etil-N-nitrosoureia (ENU), os gliomas RG2 são classificados como gliomas anaplásicos devido ao seu padrão de crescimento invasivo, alto índice mitótico e morfologia indiferenciada. Esses tumores se destacam por sua letalidade consistente in vivo e por sua capacidade de crescer em hospedeiros singênicos sem provocar uma resposta imunológica significativa. Essa baixa imunogenicidade torna a RG2 um modelo ideal para o estudo de tumores semelhantes ao glioblastoma e para o teste de terapias experimentais em contextos imunocompetentes.

As células do glioma RG2 exibem características típicas de gliomas de alto grau, incluindo rápida proliferação, capacidade invasiva e alterações genômicas. Estudos têm destacado a perda de genes supressores de tumor, como o CDKN2A, juntamente com vias desreguladas envolvendo as sinalizações de PDGF, Ras e IGF. A linhagem celular cresce in vitro na forma de células fusiformes indiferenciadas, mantendo seu potencial tumorigênico quando implantada intracranialmente, onde apresenta invasão difusa no tecido cerebral normal, imitando o comportamento do glioblastoma humano.

Essa linhagem celular tem sido amplamente utilizada em pesquisas pré-clínicas para avaliar a eficácia de várias abordagens terapêuticas, incluindo quimioterapia, radioterapia, terapia gênica e imunoterapia. Os gliomas RG2 são particularmente valiosos para testar novos métodos de administração de medicamentos, como a administração potencializada por convecção (CED), e para investigar os mecanismos de ruptura da barreira hematoencefálica em gliomas. Sua semelhança histopatológica e molecular com os glioblastomas humanos ressalta sua utilidade na neuro-oncologia translacional.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.