İçeriğe atla
RG2
Doku
Beyin
Hastalık
Sıçan malign glioması
Eş anlamlılar
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

RG2

Cell line · Ürün numarası 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

RG2 hücre hattı, Fischer 344 sıçanlarında kimyasal olarak indüklenmiş bir gliomadan türetilmiştir. Transplasental N-etil-N-nitrosoüre (ENU) uygulaması yoluyla oluşturulan RG2 gliomları, invaziv büyüme paternleri, yüksek mitotik indeksleri ve farklılaşmamış morfolojileri nedeniyle anaplastik gliomlar olarak sınıflandırılır. Bu tümörler in vivo tutarlı ölümcüllükleri ve önemli bir bağışıklık yanıtı ortaya çıkarmadan sinjeneik konaklarda büyüme yetenekleri ile dikkat çekmektedir. Bu düşük immünojenisite, RG2'yi glioblastoma benzeri tümörleri incelemek ve immünokompetan ortamlarda deneysel tedavileri test etmek için ideal bir model haline getirmektedir.

RG2 glioma hücreleri hızlı proliferasyon, invaziv kapasite ve genomik değişiklikler dahil olmak üzere yüksek dereceli gliomaların tipik özelliklerini sergiler. Çalışmalar, CDKN2A gibi tümör baskılayıcı genlerin kaybının yanı sıra PDGF, Ras ve IGF sinyalizasyonunu içeren düzensiz yolakları vurgulamıştır. Hücre hattı in vitro ortamda farklılaşmamış iğ şeklindeki hücreler olarak büyür, intrakraniyal olarak implante edildiklerinde tümörijenik potansiyellerini korurlar ve insan glioblastom davranışını taklit ederek normal beyin dokusuna yaygın invazyon gösterirler.

Bu hücre hattı, kemoterapi, radyoterapi, gen terapisi ve immünoterapi dahil olmak üzere çeşitli terapötik yaklaşımların etkinliğini değerlendirmek için klinik öncesi araştırmalarda kapsamlı bir şekilde kullanılmıştır. RG2 gliomları, konveksiyonla geliştirilmiş dağıtım (CED) gibi yeni ilaç dağıtım yöntemlerini test etmek ve gliomlarda kan-beyin bariyerinin bozulma mekanizmalarını araştırmak için özellikle değerlidir. İnsan glioblastomlarına histopatolojik ve moleküler benzerliği, translasyonel nöro-onkolojideki faydasının altını çizmektedir.

Doku
Beyin
Hastalık
Sıçan malign glioması
Uygulamalar
3D hücre kültürü, Sinirbilim
Eş anlamlılar
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Glial
Tümör oluşturucu
Evet, CD Fischer sıçanlarında

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
RG2 (Cytion katalog numarası 300649)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
Fischer 344
Bağışçının yaşı
gebelikten 20 gün sonra