Preskoči na vsebino
RG2
Tkivo
Možgani
Bolezen
Maligni gliom pri podganah
Sinonimi
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Dokumenti

RG2

Cell line · Številka izdelka 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija RG2 izhaja iz kemično povzročenega glioma pri podganah Fischer 344. Gliomi RG2, ki so nastali s transplacentarnim dajanjem N-etil-N-nitrosourea (ENU), se zaradi invazivnega vzorca rasti, visokega mitotskega indeksa in nediferencirane morfologije uvrščajo med anaplastične gliome. Ti tumorji se odlikujejo po dosledni smrtnosti in vivo in sposobnosti rasti v singeničnih gostiteljih, ne da bi sprožili pomemben imunski odziv. Zaradi nizke imunogenosti je RG2 idealen model za preučevanje glioblastom podobnih tumorjev in testiranje eksperimentalnih terapij v imunokompetentnih okoljih.

Gliomske celice RG2 imajo značilnosti, značilne za gliome visoke stopnje, vključno s hitro proliferacijo, invazivno sposobnostjo in genomskimi spremembami. Študije so izpostavile izgubo tumorskih supresorskih genov, kot je CDKN2A, skupaj z motenimi potmi, ki vključujejo signalizacijo PDGF, Ras in IGF. Celična linija raste kot nediferencirane vretenaste celice in vitro, ki ohranijo svoj tumorigeni potencial, ko jih vsadijo intrakranialno, kjer kažejo difuzno invazijo v normalno možgansko tkivo, kar posnema obnašanje človeškega glioblastoma.

Ta celična linija je bila obsežno uporabljena v predkliničnih raziskavah za oceno učinkovitosti različnih terapevtskih pristopov, vključno s kemoterapijo, radioterapijo, gensko terapijo in imunoterapijo. Gliomi RG2 so še posebej dragoceni za preskušanje novih metod dostave zdravil, kot je konvekcijsko okrepljena dostava (CED), in za raziskovanje mehanizmov motenj krvno-možganske pregrade pri gliomih. Njihova histopatološka in molekularna podobnost s človeškimi glioblastomi poudarja njihovo uporabnost v translacijski nevroonkologiji.

Tkivo
Možgani
Bolezen
Maligni gliom pri podganah
Uporaba
3D celična kultura, nevroznanost
Sinonimi
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Glijski
Tumorigeničen
Da, pri podganah CD Fischer

04Identifikatorji

Navajanje vira
RG2 (Cytionova kataloška številka 300649)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
Fischer 344
Starost darovalca
20 dni po gestaciji