Pereiti prie turinio
RG2
Audinys
Smegenys
Liga
Žiurkių piktybinė glioma
Sinonimai
RG-2, Rat Glioma-2, D74, D74-RG2

Dokumentai

RG2

Cell line · Prekės numeris 300649

The RG2 cell line is derived from a chemically induced glioma in Fischer 344 rats. Generated via transplacental administration of N-ethyl-N-nitrosourea (E...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

RG2 ląstelių linija yra gauta iš cheminiu būdu sukeltos gliomos Fischer 344 žiurkėms. RG2 gliomos, sukurtos transplacentariniu būdu vartojant N-etil-N-nitrozokarbamidą (ENU), priskiriamos anaplastinėms gliomoms dėl invazinio augimo būdo, didelio mitozės indekso ir nediferencijuotos morfologijos. Šie navikai išsiskiria nuolatiniu mirtingumu in vivo ir gebėjimu augti sinogeniniuose šeimininkuose, nesukeliant reikšmingo imuninio atsako. Dėl mažo imunogeniškumo RG2 yra idealus modelis tiriant į glioblastomą panašius navikus ir bandant eksperimentinius gydymo būdus imunokompetentinėje aplinkoje.

RG2 gliomos ląstelėms būdingos aukšto laipsnio gliomoms būdingos savybės, įskaitant spartų dauginimąsi, invazyvumą ir genomo pokyčius. Tyrimai atskleidė naviko slopintojų genų, tokių kaip CDKN2A, praradimą ir sutrikusį PDGF, Ras ir IGF signalų reguliavimą. Ląstelių linija in vitro auga kaip nediferencijuotos verpstės formos ląstelės, kurios išlaiko navikinį potencialą, kai yra implantuojamos intrakranijiniu būdu, kur jos pasižymi difuzine invazija į normalų smegenų audinį, imituodamos žmogaus glioblastomą.

Ši ląstelių linija buvo plačiai naudojama ikiklinikiniuose tyrimuose, siekiant įvertinti įvairių gydymo metodų, įskaitant chemoterapiją, radioterapiją, genų terapiją ir imunoterapiją, veiksmingumą. RG2 gliomos ypač vertingos bandant naujus vaistų pristatymo metodus, pavyzdžiui, konvekcija sustiprintą pristatymą (CED), ir tiriant gliomų kraujo ir smegenų barjero pažeidimo mechanizmus. Dėl histopatologinio ir molekulinio panašumo į žmogaus glioblastomas jų naudingumas neuroonkologijoje dar labiau padidėja.

Audinys
Smegenys
Liga
Žiurkių piktybinė glioma
Paraiškos
3D ląstelių kultūra, Neuromokslai
Sinonimai
  • RG-2
  • Rat Glioma-2
  • D74
  • D74-RG2

02Klasifikacija

Organizmas
Žiurkė
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Glijos
Tumorogeninis
Taip, su CD Fischer žiurkėmis

04Identifikatoriai

Nuoroda
RG2 (Cytion katalogo numeris 300649)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10116
Cellosaurus
CVCL_3581

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
Fischer 344
Donoro amžius
20 dienų po nėštumo